如今，單細(xì)胞多組學(xué)分析正在如火如荼地開(kāi)展，各大雜志上不斷有重磅的新成果發(fā)表。也許您也躍躍欲試，不過(guò)在此之前，您需要分離出單細(xì)胞。
您理想中的單細(xì)胞分離是不是快速而高效的，而現(xiàn)實(shí)中的過(guò)程也許是低效而漫長(zhǎng)的。在此，我們將介紹一些新的細(xì)胞分離技術(shù)并分享一些操作時(shí)的小技巧。
細(xì)胞分離的挑戰(zhàn)：
準(zhǔn)備分離單細(xì)胞的研究人員必須克服許多挑戰(zhàn)。他們希望獲得純正的目標(biāo)細(xì)胞群，且細(xì)胞的各種特征都保持不變。如何才算不錯(cuò)的分離方法？它應(yīng)當(dāng)保持細(xì)胞活力，提供足夠數(shù)量的細(xì)胞，并且可根據(jù)未來(lái)的需求而擴(kuò)展。它還能夠防止細(xì)胞聚集，并且操作起來(lái)相對(duì)簡(jiǎn)單，費(fèi)用也不太高。
新興的微流體技術(shù)：
與傳統(tǒng)的FACS相比，新型微流體細(xì)胞分選儀具有不少優(yōu)勢(shì)。它們使用較低的分選壓力，降低了SICS的風(fēng)險(xiǎn)。它們所需的樣本量也較少，可將樣本加入一次性的微流體芯片中進(jìn)行分選?；谖⒘黧w芯片的細(xì)胞分選儀的優(yōu)勢(shì)不僅在于處理微升級(jí)的樣本。近年來(lái)，微流體技術(shù)已與其他學(xué)科整合在一起，進(jìn)一步加強(qiáng)單細(xì)胞分離。
單細(xì)胞分離的小技巧：
1、縮短制備單細(xì)胞懸液的時(shí)間，以保留細(xì)胞活力；
2、考慮使用細(xì)胞篩來(lái)過(guò)濾出細(xì)胞團(tuán)塊或雙細(xì)胞；
3、注意緩沖液的選擇，包括分選和收集溶液；
4、如果您打算在分選后培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)使用對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，并確定理想培養(yǎng)條件；
5、在分選轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞時(shí)，通常在轉(zhuǎn)染后72小時(shí)進(jìn)行，以提高細(xì)胞群的生存能力；
6、如果采用熒光抗體來(lái)分離稀有細(xì)胞，請(qǐng)?jiān)谌旧半x心抗體，以便去除任何可能被誤認(rèn)為是靶細(xì)胞的熒光顆粒；
7、對(duì)于單細(xì)胞分離，在分選后別忘了離心平板，以確保細(xì)胞在孔的底部；
8、選擇一種可靠的分析技術(shù)來(lái)評(píng)估分選細(xì)胞的數(shù)量和質(zhì)量。
