在制藥行業(yè)，特別是注射用藥行業(yè)，細菌內(nèi)毒素檢測為重要質(zhì)控檢測項。根據(jù)反應(yīng)原理，內(nèi)毒素檢測方法可分為以下4種：凝膠法、濁度法、顯色法和重組C因子法。除重組C因子外，其余方法都依賴于鱟血。隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，并基于對鱟資源的保護，重組C因子法更具有適用性。

重組C因子的廣泛應(yīng)用與各國的法規(guī)狀態(tài)密切相關(guān)。目前重組C因子已經(jīng)被主流藥典所認(rèn)可， 歐洲藥典已將重組C因子寫入其2.6.32章節(jié)，其余各國藥典對重組C因子的評估項目也在不斷推進。近期，Lonza 應(yīng)美國藥典(USP)的要求進行了一項研究，用于將重組C因子內(nèi)毒素檢測方法收錄美國藥典。以下是關(guān)于美國藥典對重組C因子評估的數(shù)據(jù)更新。

實驗方案

• 收集碳床處理后水樣，并對該樣品中的葡聚糖和內(nèi)毒素含量進行測定。

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• 根據(jù)測試結(jié)果，使用碳床處理后含內(nèi)毒素水樣對阿昔洛韋、慶大霉素、胰島素以及生理鹽水IV進行加標(biāo)。

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• 分別使用動態(tài)濁度法、動態(tài)顯色法、重組c因子法（兩個廠家的試劑）對樣品進行干擾測試。

實驗結(jié)果

阿昔洛韋

阿昔洛韋樣品中本土內(nèi)毒素加標(biāo)量為3.5 EU/mL，可接受的檢測范圍為1.75EU/mL-7EU/mL（圖中陰影部分表示）。如圖1所示，動態(tài)濁度法、動態(tài)顯色法，PyroGene 重組C因子試劑均可用于該樣品內(nèi)毒素檢測。

慶大霉素

慶大霉素樣品中本土內(nèi)毒素加標(biāo)量為0.7EU/mL，可接受的檢測范圍為0.35EU/mL-1.4EU/mL（圖中藍色陰影部分表示）。如圖2所示，動態(tài)濁度法，PyroGene 重組C因子試劑可用于該樣品內(nèi)毒素檢測。

胰島素

胰島素樣品中本土內(nèi)毒素加標(biāo)量為3.5 EU/mL，可接受的檢測范圍為1.75EU/mL-7EU/mL（圖中藍色陰影部分表示）。如圖3所示，動態(tài)濁度法，PyroGene 重組C因子，rFCII重組C因子試劑可用于該樣品內(nèi)毒素檢測。

生理鹽水IV

生理鹽水IV中內(nèi)毒素加標(biāo)量為0.125 EU/mL，可接受的檢測范圍為0.0625EU/mL-0.25 EU/mL（圖中藍色陰影部分表示）。如圖4所示，動態(tài)濁度法，動態(tài)顯色法和重組C因子法可用于該產(chǎn)品的檢測。

總結(jié)

以上結(jié)果顯示，重組C因子與基于LAL的測試方法具有可比性。使用PyroGene 重組C因子產(chǎn)品進行的4種產(chǎn)品內(nèi)毒素檢測時，結(jié)果均在可接受范圍以內(nèi)。對于具體產(chǎn)品的方法選擇，可以根據(jù)產(chǎn)品的性質(zhì)來進行確定。