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你是否因為細胞轉(zhuǎn)染效率低,經(jīng)過優(yōu)化各種參數(shù)仍解決不了問題而苦惱呢,那不妨來檢測一下支原體吧,一種細胞的隱形殺手。
電轉(zhuǎn)是一個常規(guī)但不簡單的細胞轉(zhuǎn)染實驗。轉(zhuǎn)染試劑、轉(zhuǎn)染條件、底物質(zhì)量等對電轉(zhuǎn)效率的影響至關(guān)重要,Lonza Nucleofector技術(shù)為您提供電轉(zhuǎn)整套解決方案。
除了以上幾點,還需要保持良好的細胞狀態(tài)。細胞狀態(tài)不好,往往會導(dǎo)致轉(zhuǎn)染效率低下,為確保良好的細胞狀態(tài),需注意以下幾點:
細胞應(yīng)處于對數(shù)生長期,此時細胞膜的恢復(fù)能力更強,從而提高電轉(zhuǎn)后的細胞存活率。
細胞的傳代次數(shù)應(yīng)較低,轉(zhuǎn)染實驗前,細胞解凍后傳代3~4次。
必須進行支原體污染的常規(guī)檢查。支原體生長緩慢,非常隱蔽,很難監(jiān)測和預(yù)防,細胞被支原體污染后,不會馬上死亡,但幾乎可以改變細胞的所有功能,包括細胞新陳代謝、酶的作用途徑,染色體畸變、細胞膜的組成等。在細胞培養(yǎng)過程中,支原體污染也會極大地影響細胞轉(zhuǎn)染的效率。
選擇合適的支原體檢測試劑,小編助力您成為電轉(zhuǎn)高手!
Lonza MycoAlert™支原體檢測試劑盒主要有兩大優(yōu)勢:
1)操作簡單;
2)檢測時間短。
其通過檢測在支原體和其柔膜細菌中存在的乙酸激酶和氨基甲酸激酶的活性,完成支原體檢測。僅需兩步簡單操作,20分鐘即可完成檢測。
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