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微流控毛細管電泳答疑小課堂

2024-1-25  閱讀(719)

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Revvity的明星產品LabChip GXII Touch 毛細管電泳系統(tǒng)采用一個單吸管微流體芯片,可快速對96或384孔板中的蛋白質樣品進行指征分析。微流體芯片技術可全自動的完成蛋白質樣品的染色、脫色、電泳分離和分析。Labchip儀器的光學元件檢測到激光誘導的熒光信號后,易于操作的系統(tǒng)軟件自動分析數(shù)據(jù),并通過Ladder和內標校正為用戶提供蛋白質相對濃度、分子大小和純度等??闪⒓瓷商摂M膠圖、電泳峰圖或匯總表格式的電子數(shù)據(jù)結果以供用戶查閱或報告(如圖1)。




圖1. LabChip GXII Touch 軟件的圖形化用戶界面

常見問題

Q

Low marker的作用是什么?

A

用于校正、對齊。比如跑400個樣品,出峰時間會有差異,必須用Low marker校正。

Q

為什么有的樣品比Ladder跑得慢?

A

因為試劑中的Ladder是沒有經過任何糖基化等修飾的,若樣品是經過修飾的,分子量就偏大,會跑得稍慢,基于原理,這一點在任何CE技術中都一樣,無法避免。


Q

蛋白芯片與核酸芯片有什么不同?

A

蛋白芯片有脫色步驟,因為蛋白變性后,樣品中有大量的SDS,需要去掉沒有與蛋白結合的SDS,否則背景值會很高。另外蛋白芯片不需要wash,而核酸芯片需要wash,因為蛋白芯片使用較快,能檢測的樣本只有400/200,經過測試發(fā)現(xiàn)不wash,對性能沒有影響。(此處Wash指實驗結束后芯片加Storage Buffer后放在設備上wash。)


Q

機器Purge的功能有什么作用?

A

Purge是施加3 min的正壓來疏通管路,防止冷凝水等堵塞管路。


Q

機器是否需要每天關機?

A

若做不到每天關機,至少需要2-3天重啟一下機器。


Q

上一個樣品run完到下一個樣品會有一個wash的過程,這一步是否能夠wash干凈?

A

可以一針樣品一針水去測試,實際測試結果是上一個樣品不會對下一個樣品產生干擾。


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