在動物模型中，腦神經(jīng)退行性生物標(biāo)志物會排入頸部淋巴結(jié) （CLN），并且引流功能會隨著年齡的增長而降低。如果這發(fā)生在人類中，CLN 可能提供一種易于獲得的蛋白質(zhì)清除率方面的測量方法。本研究提供了在人類 CLN 中可檢測到神經(jīng)退行性生物標(biāo)志物的第一個證據(jù)。結(jié)果顯示除NFL外，所有 CLN 生物標(biāo)志物濃度均顯著高于血漿濃度，p-Tau181，其 CLN 濃度隨年齡增長而降低。CLN-血漿生物標(biāo)志物比率升高表明它們在 CLN 中的濃度可能為腦清除和淋巴引流提供了一個測量方式，可能適用于衰老研究和未來的臨床試驗。

期刊：Brain 2024年10月

牛津大學(xué) 精神病學(xué)系

瑞典哥德堡大學(xué)

研究背景

神經(jīng)退行性疾病的特征是異常蛋白質(zhì)在大腦中積累。阿爾茨海默病的病理標(biāo)志是 β 淀粉樣蛋白斑塊和高度磷酸化的tau纏結(jié)。這些神經(jīng)退行性生物標(biāo)志物可以在腦脊液和血液中測量，為阿爾茨海默病和其他癡呆癥的病理生理學(xué)以及臨床診斷、預(yù)后和監(jiān)測提供有價值的見解。了解這些蛋白質(zhì)如何從中樞進入外周系統(tǒng)，可能是評估癡呆癥患者大腦清除能力受損的關(guān)鍵。最近發(fā)現(xiàn)淋巴和腦膜淋巴管系統(tǒng)是腦脊液大分子從大腦向外周外排的候選者。在小鼠體內(nèi)追蹤 CSF 注射的分子，以及在人類中進行造影劑研究表明，這種腦膜淋巴流出物直接排入CLN。上游淋巴外流的破壞可以加速腦 Aβ 斑塊的形成。由于CLN 是顱外的，而且可能是該引流系統(tǒng)中的會聚樞紐。因此，我們預(yù)測人類 CLN 采樣可以更好的模擬和監(jiān)視腦內(nèi)標(biāo)志物的變化。

研究方法

文章在兩個人群中使用simoa測量了通過超聲引導(dǎo)細(xì)針穿刺（FNA）獲得的CLN 抽吸物和血漿Aβ 40, 42、p-Tau181、GFAP和NFL的濃度。

i）25名自身免疫患者的發(fā)現(xiàn)隊列

ii）四名健康志愿者的血漿、CLN和毛細(xì)血管血的優(yōu)化隊列。

研究結(jié)果

1．在發(fā)現(xiàn)隊列中，所有 5 種生物標(biāo)志物都存在于所有 CLN 樣本中，但 NfL 只在部分樣本中存在（圖 1A-B）。校正后的 Aβ40 、 Aβ42 和 pTau181 CLN 濃度顯著高于血漿。對于 pTau181，差異幅度最大，CLN中濃度是血漿的65倍。GFAP 和 NfL 未觀察到顯著差異。

在所有 CLN 上清液和所有四名健康參與者的配對血漿中均可檢測到所有生物標(biāo)志物（圖 1C-D）。與血漿相比，所有 CLN 樣本均顯示更高的 Aβ40 、 Aβ42 、 pTau181 和 GFAP 濃度，以及與毛細(xì)血管血中相比，CLN的Aβ40、pTau181 和 GFAP更高。

圖 1 血漿中校正的癡呆液體生物標(biāo)志物濃度與毛細(xì)血管和頸部淋巴結(jié)上清液的比較

2. 在動物模型中，隨著年齡的增長，AD 病理相關(guān)蛋白向 CLN 的淋巴引流較少。為了在人類中探索這一假設(shè)，我們觀察到血漿 pTau181 與年齡呈正相關(guān)，但 CLN 水平顯示 pTau181 與年齡呈負(fù)相關(guān)（圖 2）。

圖 2 頸部淋巴結(jié)和血漿p-Tau181濃度與年齡的關(guān)系

結(jié)論

結(jié)果表明，CLN 抽吸物含有目前用作神經(jīng)退行性生物標(biāo)志物的蛋白質(zhì)的濃縮水平。鑒于大腦和 CLN 之間的直接和密切聯(lián)系，認(rèn)為 CLN可能代表腦引流相關(guān)物質(zhì)的來源。FNA 方法由放射科醫(yī)生專家進行，并被證明安全又微創(chuàng)，與廣泛使用的腰椎穿刺腦脊液采樣做法相比具有優(yōu)勢。CLN生物標(biāo)志物水平也顯示出比血液更高的濃度，并且不受外周組織的污染。因此我們建議 CLN 采樣可以成為一種有價值的補充研究工具，以研究健康和疾病中蛋白質(zhì)從大腦到外的周清除情況，包括在神經(jīng)退行性疾病的研究中。

總之，文章提供了獨立驗證的證據(jù)來支持 CLN 中存在癡呆液體生物標(biāo)志物，除 NfL 外，其水平明顯高于循環(huán)血漿。此外文章在人類中提供了第一個證據(jù)表明，隨著疾病相關(guān)生物標(biāo)志物 pTau181 的年齡增長，腦淋巴引流減少。綜上所述，這些觀察結(jié)果可能反映了縱向量化 CLN腦部疾病生物標(biāo)志物反應(yīng)體內(nèi)淋巴引流的潛力，并且在人類實驗醫(yī)學(xué)研究和早期臨床試驗中評估腦蛋白清除率可能具有重要價值。

文章的局限性包括我們的優(yōu)化隊列中的人數(shù)少、各種自身免疫性神經(jīng)系統(tǒng)疾病的潛在混淆以及樣品制備的差異。