這款試劑盒可應(yīng)用于：

1. 蛋白質(zhì) - 蛋白質(zhì)相互作用分析；

2. 蛋白質(zhì) - 多肽相互作用分析；

3. GST 標記蛋白的檢測和定量；

4. 蛋白質(zhì)表達；

5. 結(jié)合活性研究。

在典型的 AlphaScreen^®分析中，感興趣的生物分子被化并與鏈霉親和素包被的供體珠子結(jié)合。另一種生物分子帶有 GST 標簽，并與 AlphaScreen^® 抗 GST 受體珠子結(jié)合。如果這兩種生物分子相互結(jié)合，供體和受體珠子就會靠近。激發(fā)供體珠子會導(dǎo)致單線態(tài)氧的釋放，單線態(tài)氧擴散并在受體珠子靠近時觸發(fā)其發(fā)光。光的量與相互作用的程度成正比。使用試劑盒中提供的化 GST 探針也可以進行競爭形式的分析。

AlphaScreen^® 和 AlphaLISA™是基于珠子的分析技術(shù)，用于以微孔板形式研究生物分子相互作用。首字母縮略詞 “Alpha" 代表放大的發(fā)光鄰近均相分析。顧名思義，這些技術(shù)的一些關(guān)鍵特征為它們是非放射性的均相分析。捕獲在珠子上的分子結(jié)合會導(dǎo)致能量從一個珠子轉(zhuǎn)移到另一個珠子，最終產(chǎn)生發(fā)光/熒光信號。要理解信號是如何產(chǎn)生的，必須首先了解珠子。AlphaScreen^® 和 AlphaLISA™分析需要兩種珠子類型：供體珠子和受體珠子。每種珠子類型都含有不同的專有的化學(xué)混合物，這是 AlphaScreen^® 技術(shù)的關(guān)鍵要素。供體珠子含有光敏劑酞菁，在680nm 光照下，它將環(huán)境中的氧氣轉(zhuǎn)化為激發(fā)態(tài)和活性形式的 O2，即單線態(tài)氧。請注意，單線態(tài)氧不是自由基；它是具有單個激發(fā)電子的分子氧。像其他激發(fā)分子一樣，單線態(tài)氧在回到基態(tài)之前具有有限的壽命。在其 4 微秒的半衰期內(nèi)，單線態(tài)氧在溶液中可以擴散約 200 納米。如果受體珠子在這個鄰近范圍內(nèi)，能量就會從單線態(tài)氧轉(zhuǎn)移到受體珠子內(nèi)的噻嗯衍生物中，隨后在 520 - 620nm（AlphaScreen）或 615nm（AlphaLISA）處產(chǎn)生光。在沒有受體珠子的情況下，單線態(tài)氧回到基態(tài)，不會產(chǎn)生信號。這種依賴于鄰近度的化學(xué)能量轉(zhuǎn)移是 AlphaScreen 均相性質(zhì)的基礎(chǔ)。