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2x 長片段PCR 擴增 預混液（ long fragment PCR Master Mix）說明書

時間：2023/8/23閱讀：310
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使用方法

  1. 充分溶解并混勻PCR反應所需的各種溶液。將2x 長片段PCR 擴增 預混液（ long fragment PCR Master Mix）置于冰浴上或冰盒內(nèi)。參考下表在冰上設置PCR反應：

Component20uL RXN25uL RXN50uL RXNFinal Concentration
2x 長片段PCR 擴增 預混液10uL12.5uL25uL1 ×
10uM Forward Primer0.4uL0.5uL1.0uL0.2uM
10uM Reverse Primer0.4uL0.5uL1.0uL0.2uM
Template DNAvariablevariablevariablevariable
Nuclease-Free Waterto 20uLto 25uLto 50uL
2 . 不同模板最佳反應濃度有所不同，反應體系推薦模板使用量可參見下表。
Template DNA20uLRXN25uL RXN50uL RXN
Genomic DNA4ng-0.4ug5ng-0.5ug10ng-1ug
Plasmid or Vrial4pg-4ng5pg-5ng10pg-10ng
cDNA4pg-0.4ug5pg-0.5ug10pg-1ug
3. 用移液器輕輕吹打混勻或輕微Vortex混勻，室溫離心數(shù)秒，使液體積聚于管底。
反應程序
1 .退火溫度應根據(jù)引物Tm值進行調整(50-72℃)。
2. 延伸時間需根據(jù)擴增片段的長度和復雜性進行調整。
3. 各設置好的PCR反應管置于PCR儀上，開始PCR反應。
STEPTEMPTIME
Initial Denaturation98°C30 sec
25–35 Cycles98°C10 sec

50–72 °C15 sec

72°C15-30 sec/kb
Final Extension72°C5 min
Hold4–10 °C∞
運輸及保存方法
-20℃ 保存 一年 干冰運輸


貨號品名規(guī)格品牌
78DC10152-1ml2x 長片段PCR 擴增 預混液（long fragment PCR Master Mix）1mlBIOHUB
78DC10152-5ml2x 長片段PCR 擴增 預混液（long fragment PCR Master Mix）5mlBIOHUB
78DC10152-3*5ml2x 長片段PCR 擴增 預混液（long fragment PCR Master Mix）3*5mlBIOHUB







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