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PCR儀是如何校準(zhǔn)參數(shù)的

閱讀:626      發(fā)布時(shí)間:2024-5-21
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PCR儀適用的實(shí)驗(yàn)方法:兼容染料及TaqMan探針法。
應(yīng)用領(lǐng)域:
遺傳性疾病病和某些疑難病的診斷
病原體的檢測(cè)
法醫(yī)和刑偵鑒定
癌基因的檢查
生物物種鑒定,系統(tǒng)進(jìn)化研究
親子關(guān)系鑒別
動(dòng)植物檢疫(轉(zhuǎn)基因動(dòng)植物檢測(cè))
基因的分享和克隆
在反應(yīng)的過程中,溫度示值與設(shè)定值是否準(zhǔn)確,我們需要知道。這是第一個(gè)溫度示值誤差;因?yàn)槲覀冃枰郎?,降溫,升溫,這是不是涉及到一個(gè)速率的問題,升降溫的快慢,會(huì)直接影響到整個(gè)反應(yīng)過程,所以,升降溫速率也是我們需要考量的一個(gè)方向。儀器通過加熱模塊去控制溫度,在快速升降溫的過程中,儀器不可避免的會(huì)先升高/降低溫度之后,再達(dá)到所設(shè)定的問題,這就是溫度的過沖,這也是可能也是一個(gè)考量的指標(biāo)。達(dá)到一定的溫度之后,儀器要平衡一段時(shí)間(所設(shè)定的時(shí)間),而溫度平衡的時(shí)間和設(shè)置的時(shí)間,是否一致,也是要考慮的一個(gè)方向。不同的DNA模板,需要的溫度和解鏈的時(shí)間不一樣,如果解鏈的時(shí)間沒達(dá)到要求,DNA沒有變性,在降溫復(fù)性的過程中,會(huì)恢復(fù)到天然的狀態(tài)。
PCR儀有48孔、96孔、384孔,每一個(gè)孔都可以放一個(gè)樣品,自然我們上面所說的溫度參數(shù),還是有一些不全。這里大致總結(jié)一下:溫度示值誤差、溫度均勻性、溫度最大沖量、溫度持續(xù)時(shí)間準(zhǔn)確度、平均升降溫速率,最大升降溫速率等。

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