原理
分光光度計采用個可以產(chǎn)生多個波長的光源，通過系列分光裝置，從而產(chǎn)生定波長的光源，光線透過測試的樣品后，分光線被吸收，計算樣品的吸光值，從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
單色光輻射穿過被測物質(zhì)溶液時，被該物質(zhì)吸收的量與該物質(zhì)的濃度和液層的厚度(光路長度)成正比，其關(guān)系如下式:
A=-lg(I/I。)=-lgT=kLc
式中 :A 為吸光度;
I。為入射的單色光強度;
I 為透射的單色光強度;
T 為物質(zhì)的透射率;
k 為摩爾吸收系數(shù);
L 為被分析物質(zhì)的光程，即比色皿的邊長;
c 為物質(zhì)的濃度;
物質(zhì)對光的選擇性吸收波長，以及相應的吸收系數(shù)是該物質(zhì)的物理常數(shù)。當已知某純物質(zhì)在定條件下的吸收系數(shù)后可用同樣條件將該供試品配成溶液，測定其吸收度,即可由上式計算出供試品中該物質(zhì)的含量。在可見光區(qū)，除某些物質(zhì)對光有吸收外，很多物質(zhì)本身并沒有吸收但可在定條件下加入顯色試劑或經(jīng)過處理使其顯色后再測定,故又稱比色分析。由于顯色時影響呈色深淺的因素較多，且常使用單色光純度較差的儀器，故測定時應用標準品或?qū)φ掌吠瑫r操作。
操作使用方法
1.接通電源，打開儀器開關(guān)，掀開樣品室暗箱蓋，預熱10分鐘。
2.將靈敏度開關(guān)調(diào)至"1"檔(若零點調(diào)節(jié)器調(diào)不到"0"時，需選用較。)
3.根據(jù)所需波長轉(zhuǎn)動波長選擇鈕。
4.將液及測定液分別倒入比色杯3/4處，用擦鏡紙擦清外壁，放入樣品室內(nèi)，使管對準光路。
5.在暗箱蓋開啟狀態(tài)下調(diào)節(jié)零點調(diào)節(jié)器，使讀數(shù)盤針向t=0處。
6.蓋上暗箱蓋，調(diào)節(jié)"100"調(diào)節(jié)器，使管的t=100，針穩(wěn)定后逐步拉出樣品滑竿，分別讀出測定管的光密度值，并記錄。
7.比色畢，關(guān)上電源，取出比色皿洗凈，樣品室用軟布或軟紙擦凈。
注意事項
1.該儀器應放在干燥的房間內(nèi)，使用時放置在堅固平穩(wěn)的作臺上，室內(nèi)照明不宜太強。熱天時不能用電扇直接向儀器吹風，防止燈泡燈絲發(fā)亮不穩(wěn)定。
2.使用本儀器前，使用者應該了解本儀器的結(jié)構(gòu)和作原理，以及各個操縱旋鈕之能。在未按通電源之前，應該對儀器的安性能行檢查，電源接線應牢固，通電也要良好，各個調(diào)節(jié)旋鈕的起始位置應該正確，然后再按通電源開關(guān)。
3.在儀器尚未接通電源時，電表針于"0"刻線上，若不是這種情況，則可以用電表上的校正螺絲行調(diào)節(jié)。
日常維護
分析儀器作者要懂得儀器的日常維護和對主要標的簡易測試方法，自己經(jīng)常對儀器行維護和測試，以保證儀器作在狀態(tài)。
、溫度和濕度是影響儀器性能的重要因素。他們可以引起機械件的銹蝕，使金屬鏡面的光潔度下降，引起儀器機械分的誤差或性能下降;成光學件如光柵、反射鏡、聚焦鏡等的鋁膜銹蝕，產(chǎn)生光能不足、雜散光、噪聲等，甚至儀器停止作，從而影響儀器壽命。維護保養(yǎng)時應定期加以校正。應具備四季恒濕的儀器室，配置恒溫設(shè)備，別是地處南方地區(qū)的實驗室。
二、環(huán)境中的塵埃和腐蝕性氣體亦可以影響機械系統(tǒng)的靈活性、降低各種限位開關(guān)、按鍵、光電偶合器的可靠性，也是成學件鋁膜銹蝕的原因之。因此定期清潔，保障環(huán)境和儀器室內(nèi)衛(wèi)生條件，防塵。
三、儀器使用定周期后，內(nèi)會積累定量的塵埃，由維修程師或在程師導下定期開啟儀器外罩對內(nèi)行除塵作，同時將各發(fā)熱元件的散熱器重新緊固，對光學盒的密封窗口行清潔，時對光路行校準，對機械分行清潔和的潤滑，后，恢復原狀，再行些的檢測、調(diào)校與記錄。
