關(guān)于懸浮細(xì)胞換液需要注意的事項

1、細(xì)胞換液是否需要用PBS清洗

我們知道，在“貼壁細(xì)胞傳代"中，培養(yǎng)基中的血清會抑制胰酶的活性，影響消化的效果，所以必須要PBS 的清洗。但對于細(xì)胞換液，尚未查到有資料明確說明是否需要PBS清洗。我覺得這里應(yīng)該根據(jù)細(xì)胞的具體情況考慮：

1.若細(xì)胞比較“嬌氣"或生長狀態(tài)不是特別好時，建議還是不要用PBS清洗。

一方面，細(xì)胞貼壁的狀態(tài)可能不是很牢固，PBS的沖洗會破壞細(xì)胞的貼壁狀態(tài)；另一方面，PBS可能會洗掉細(xì)胞分泌的一些生長因子，這同樣不利于細(xì)胞狀態(tài)的調(diào)整。如果一定要洗，可以緩慢清洗，減少對細(xì)胞的傷害

2.當(dāng)細(xì)胞生長狀態(tài)不錯，或者顯微鏡下觀察細(xì)胞液中不是很干凈時，可以選擇用PBS清洗。

一方面可以去除積累的代謝物；另一方面，也可將一些生長狀態(tài)不好或衰老的細(xì)胞洗脫下來，保持細(xì)胞活力。


2、什么是“細(xì)胞半換液"

“細(xì)胞半換液"又稱“細(xì)胞半量換液"，即棄掉一半舊的培養(yǎng)基，再加一半新的進(jìn)去。選它的原因其實與前面不加PBS的理由有點相近。

其原因包括：

1.給細(xì)胞提供適應(yīng)的緩沖環(huán)境；

2.細(xì)胞生長過程中可能會分泌某些生長因子，促進(jìn)生長。

3.節(jié)省材料

4.方便操作：比如96孔板，換液很麻煩。所以常采用排槍進(jìn)行半換液

5.對于懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)，有時也會選用半換液減低細(xì)胞密度