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常用的基因沉默技術(shù)有哪些
RNA干擾(RNAi):RNAi技術(shù)利用雙鏈RNA(dsRNA)引發(fā)特異性mRNA的降解,從而降低或關(guān)閉目標(biāo)基因的表達(dá)。RNAi技術(shù)具有高效、特異性強(qiáng)、操作簡單等優(yōu)點(diǎn),已成為研究基因功能和藥物篩選的重要工具。然而,該技術(shù)也存在一定的脫靶效應(yīng)和細(xì)胞毒性等問題。
化學(xué)沉默:化學(xué)沉默是指通過特定的化學(xué)抑制劑或藥物作用于細(xì)胞,干擾基因的表達(dá)或轉(zhuǎn)錄過程,從而實(shí)現(xiàn)基因沉默。常用的化學(xué)沉默藥物包括DNA甲基化抑制劑、組蛋白去乙?;敢种苿┑?。這類方法的優(yōu)點(diǎn)是可以通過口服或注射給藥,直接作用于患者體液或組織,但對于作用機(jī)制和藥物劑量要求較高。
基因敲除:基因敲除技術(shù)通過同源重組或CRISPR-Cas9等手段,將目標(biāo)基因進(jìn)行部分或敲除。該技術(shù)具有較高的特異性和可操作性,但需要設(shè)計(jì)特異性的核酸酶,且存在一定的細(xì)胞毒性風(fēng)險(xiǎn)。
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