COS-7（非洲綠猴SV40轉化的腎細胞）說明書

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COS-7(非洲綠猴SV40轉化的腎細胞)說明書細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。

COS-7(非洲綠猴SV40轉化的腎細胞)說明書細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

kasumi-1, 人白血病細胞株雙孢蘑菇 Agaricus bisporus

大鼠大隱靜脈內皮細胞*培養(yǎng)基NCI-H1688(人典型小細胞肺細胞)

SP2/0, 小鼠骨髓瘤細胞豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum

小鼠腺上皮細胞*培養(yǎng)基SK-CO-1(人結直腸腺細胞)

炭黑曲霉 Aspergillus carbonariusWERI-Rb-1(人視網膜神經膠質瘤細胞)

肉桂紫正青霉 Eupenicillium cinnamopurpureumMolt-4(人急性淋巴母細胞白血病細胞)

灰葡萄孢 Botrytis cinerea土生假絲酵母 Candida humicola

大鼠支氣管成纖維細胞*培養(yǎng)基天津棒桿菌 Corynebacterium tianjin

豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna雙孢蘑菇

大鼠心肌細胞*培養(yǎng)基MDA-MB-415(人腺細胞)

BC-020(人腺細胞)彎曲桿菌 Lactobacillus curvatus

人臍靜脈平滑肌細胞RTE(大鼠氣管上皮細胞)

柄鏈格孢=柄格孢菌 Alternaria longipes糙皮側耳 Pleurotus ostreatus
COS-7(非洲綠猴SV40轉化的腎細胞)說明書1 kit (10 labeling reactions and detection of 10 blots of 10 x 10 cm2)DIG-Northern Starter Kit

20 columnsQUICK SPIN G-25 DNA (100400) 2

50 columnsQUICK SPIN G-50 DNA (100408) 5

20 columnsQUICK SPIN G-50 DNA (100406) 2

50 columnsQUICK SPIN G-25 DNA (100402) 5

20 columnsQUICK SPIN G-25 RNA (100621) 2

20 columnsQUICK SPIN G-50 RNA(100411) 20

1 kit (up to 288 isolations)MagNA Pure LC Total Nucleic Acid Isolation Kit（High Performance: Maximum Recovery of Viral Nucleic Acids）