產品展廳收藏該商鋪

您好 登錄 注冊

當前位置:
上海撫生實業(yè)有限公司>>熒光PCR檢測試劑盒>>熒光PCR定量試劑盒>>小鼠肝炎病毒RT-PCR試劑盒說明書

小鼠肝炎病毒RT-PCR試劑盒說明書

返回列表頁
  • 小鼠肝炎病毒RT-PCR試劑盒說明書

  • 小鼠肝炎病毒RT-PCR試劑盒說明書

  • 小鼠肝炎病毒RT-PCR試劑盒說明書

  • 小鼠肝炎病毒RT-PCR試劑盒說明書

收藏
舉報
參考價 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 型號
  • 品牌 其他品牌
  • 廠商性質 經銷商
  • 所在地 上海市

在線詢價 收藏產品 加入對比 查看聯系電話

更新時間:2022-02-15 12:21:08瀏覽次數:530

聯系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息,謝謝!

產品簡介

供貨周期 現貨 規(guī)格 50次
貨號 FS-01H3591 應用領域 化工
主要用途 公司產品僅用于科研    
小鼠肝炎病毒RT-PCR試劑盒說明書的相關產品:Artemin抗體
P53凋亡刺激2抗體
血管緊張I抗體

詳細介紹

操作流程:

收集基因信息——>設計引物——>PCR ——>回收目的片段——>與載體連接,取得連接產物 ——> 用感受態(tài)細胞做轉化 ——>接菌——>陽性克隆(酶切法或PCR)——>質粒抽提——>質粒測序——>測序結果分析——>克隆信息輸入數據庫——>質粒實物保存。

特別提示:本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

產品名稱

規(guī)格

貨號

小鼠肝炎病毒RT-PCR試劑盒說明書

50次

FS-01H3591

 


操作流程.jpg

 

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。

10×PCR buffer

5 μl     dNTP mix (2mM)

4 μl     引物1(10pM)

2 μl     引物2(10pM)

2 μl     Taq酶 (2U/μl)

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)

1 μl      加ddH2O至 50 μl

產品特點:

◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;

◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;

◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;

◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

實時熒光定量PCR:

實時熒光定量PCR技術有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點檢測的局限,實現了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強度,并記錄在電腦軟件之中,通過對每個樣品Ct值的計算,根據標準曲線獲得定量結果。因此,實時熒光定量PCR無需內標是建立在兩個基礎之上的:

1)Ct值的重現性PCR循環(huán)在到達Ct值所在的循環(huán)數時,剛剛進入真正的指數擴增期(對數期),此時微小誤差尚未放大,因此Ct值的重現性同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內擴增,得到的Ct值是恒定的。

2)Ct值與起始模板的線性關系由于Ct值與起始模板的對數存在線性關系,可利用標準曲線對未知樣品進行定量測定,因此,實時熒光定量PCR是一種采用外標準曲線定量的方法。

外標準曲線的定量方法相比內標法是一種準確的、值得信賴的科學方法。利用外標準曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量最準確,重現性定量方法,已得到的*,廣泛用于基因表達研究、轉基因研究,藥物療效考核、病原體檢測等諸多領域。

定量PCR方法:

a、競爭法

選擇由突變克隆產生的含有一個新內切位點的外源競爭性模板。在同一反應管中,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增(其中一個引物為熒光標記)。擴增后用內切酶消化PCR產物,競爭性模板的產物被酶解為兩個片段,而待測模板不被酶切,可通過電泳或高效液相將兩種產物分開,分別測定熒光強度,根據已知模板推測未知模板的起始拷貝數。

b、內參照法

在不同的PCR反應管中加入已定量的內標和引物,內標用基因工程方法合成。上游引物用熒光標記,下游引物不標記。在模板擴增的同時,內標也被擴增。在PCR產物中,由于內標與靶模板的長度不同,二者的擴增產物可用電泳或高效液相分離開來,分別測定其熒光強度,以內標為對照定量待檢測

128397-41-1原;Hydroprotopin 規(guī)格: 20mg

白土苓(短柱肖菝契) 規(guī)格: 10g

火炭母 規(guī)格: 2g

527-95-7草質;Herbacetin 規(guī)格: 20mg

51317-08-9β-桉葉 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial

123040-16-4阿扎司瓊 規(guī)格: 100mg

83-88-5B2;純品型;標準品;有證書 規(guī)格: 0.25g

1,3,5,8-四羥基山 規(guī)格: 10mg

2,3-二胺 規(guī)格: 100mg

400603-95-4血竭 規(guī)格: 20mg

小鼠肝炎病毒RT-PCR試劑盒說明書APC(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)  100微克

CDK2(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)  100微克

CDK3(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)  100微克

CDK4(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)  100微克

CDK6(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)  100微克

P16(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)  100微克

P21(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)  100微克

P27(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)  100微克

P35(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)  100微克

使用方法:

一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。

1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。

2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。

3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。

4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。

5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。

6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。

二、樣品 DNA 的制備

7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產品跟市場上絕大多數核酸純化產品兼容。

8. 如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。

三、設置 qPCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)

9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復,則標記 N+9 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復,則標記 N+4 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。

其他推薦產品

更多

收藏該商鋪

登錄 后再收藏

提示

您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~

對比框

產品對比 產品對比 聯系電話 二維碼 意見反饋 在線交流

掃一掃訪問手機商鋪
021-52961053
在線留言