詳細(xì)介紹
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品名稱:糖原含量試劑盒-酶法價(jià)格
規(guī)格:48樣 48樣 96樣
貨號(hào):AS220
檢測(cè)方法:可見分光光度法 微板法 微板法
產(chǎn)品分類:碳水化合物代謝系列
貯存溫度:2~8℃。
本試劑盒保質(zhì)期:6個(gè)月。本產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:
先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。
HSP10/CPN10 熱休克10抗體 規(guī)格: 0.2ml
Nrf2 核因子2相關(guān)因子2抗體 規(guī)格: 0.1mlphospho C-Met/HGFR(Tyr1365) 磷化原基因c-Met抗體 規(guī)格: 0.1ml
KLHL14 Kelch樣14抗體 規(guī)格: 0.2ml
RAB4 基因RAS相關(guān)Rab4A抗體 規(guī)格: 0.2ml
CMG1 毛細(xì)管形態(tài)發(fā)生1抗體 規(guī)格: 0.2ml
IFN gamma(F2E4) γ-干擾單克隆抗體 規(guī)格: 0.1ml
FGFR1OP/FOP 成纖維細(xì)胞生因子受體1原基因伴侶抗體 規(guī)格: 0.2ml
Nm23/NME1/NME2 瘤轉(zhuǎn)移抑制基因抗體 規(guī)格: 0.1ml
UBE2U 泛連接U抗體 規(guī)格: 0.2ml
KLHL36/C16orf44 Kelch樣36抗體 規(guī)格: 0.2mlCASC5 瘤易感性候選基因5抗體 規(guī)格: 0.2ml
CHCHD2 丙型肝炎NS2反式調(diào)節(jié)/衰老相關(guān)的基因10抗體 規(guī)格: 0.2ml
糖原含量試劑盒-酶法價(jià)格141-82-2丙二 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
107-35-7?;?規(guī)格: 20mg
482-48-4異佛手柑內(nèi)酯 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
甘草二銨 規(guī)格: 30mg
18916-17-1柚皮甙二氫查爾;Naringin di 規(guī)格: 20mg
123-11-5大茴香醛 規(guī)格: 20mg
60-33-3亞油 規(guī)格: 0.2ml
2216-51-5L-;L-Menthol 規(guī)格: 20mg
88182-33-6歐當(dāng)歸內(nèi)酯A 規(guī)格: 20mg
20(S)-人參皂F1 規(guī)格: 20mg
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。