詳細介紹
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品名稱:脂肪酸合成酶(FAS)試劑盒科研
規(guī)格:24樣 48樣
貨號:AS360
檢測方法:紫外分光光度法 微板法
產(chǎn)品分類:脂肪酸系列
貯存溫度:2~8℃。
本試劑盒保質(zhì)期:6個月。本產(chǎn)品僅用于科研實驗。
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗
樣本和試劑浪費!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取
② 細菌/細胞樣本:
先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。
去氧膽酸鹽枸櫞酸鹽瓊脂 英文名稱:Desoxycholate Citrate Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g
吲哚培養(yǎng)基(蛋白胨) 英文名稱:Indole Medium 產(chǎn)品規(guī)格:10g
EF-18瓊脂 英文名稱:EF-18 Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g
RVS肉湯 英文名稱:RVS Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g
MKTTn肉湯(ISO) 英文名稱:MKTTn Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g
賴鐵瓊脂(LIA) 英文名稱:Lysine Iron Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g
改良MSRV培養(yǎng)基 英文名稱:MSRV Medium,Modified 產(chǎn)品規(guī)格:250g
BPL瓊脂 英文名稱:BPL Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g
BPLS瓊脂 英文名稱:BPLS Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g
MIO培養(yǎng)基 英文名稱:MIO Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g
脂肪酸合成酶(FAS)試劑盒科研62006-39-7洋川芎內(nèi)酯A 規(guī)格: HPLC≥98%,50mg/vial
金盞銀盤 規(guī)格: 2.0g
炔呋;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 規(guī)格: 0.1g
6155-35-7鼠李糖 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg/vial
474-25-9 規(guī)格: 30mg
牛蒡 規(guī)格: 20mg
北豆根 規(guī)格: 1g
471-54-5異古倫賓;IsocoluMbin 規(guī)格: 20mg
152-93-2蠶豆 規(guī)格: 20mg
磺鈉 規(guī)格: