8
13365216078
當(dāng)前位置：首頁>>技術(shù)中心>>技術(shù)文章>>在使用超濾離心管時您所需要注意的事項分析
在線溝通：
唐蘇強(qiáng) （銷售經(jīng)理）
- 電話：
- 手機(jī)：
- 13365216078
- 售后電話：
- 13365216078
- 傳真：
- 聯(lián)系我時，
- 告知來自化工儀器網(wǎng)
- 個性化：
- www.lvmengyq.com
- 手機(jī)站：
- m.lvmengyq.com
- 商鋪網(wǎng)址：
- http://true-witness.com/st392766/
- 公司網(wǎng)站：
- http://www.gmhplc.com/
在使用超濾離心管時您所需要注意的事項分析
閱讀：2560發(fā)布時間：2020-3-3
新買來的超濾離心管是干燥的，使用前加入超純水，水量*過膜，冰浴或冰箱里預(yù)冷幾分鐘。然后將水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超過管頂?shù)陌拙€為準(zhǔn)。操作要輕，加入蛋白液前，需要插在冰上預(yù)冷。
不同離心機(jī)的轉(zhuǎn)速rpm換算成g之后，有所不同。離心機(jī)的加速度調(diào)至低檔，減小對膜的壓力。注意，一定要等離心機(jī)達(dá)到目的轉(zhuǎn)速之后，方可離開離心機(jī)，否則離心機(jī)出問題時，無法快速處理。膜與轉(zhuǎn)軸的方向根據(jù)說明書調(diào)整。在實際使用中，一般轉(zhuǎn)速開的比說明書里的要低，這樣可以延長離心管的使用壽命。
當(dāng)濃縮到剩下1ml時，取50ul緩沖溶液，加入10ul流穿，看有沒變藍(lán)色，以此判斷超濾離心管是否漏掉蛋白。如果管漏了，將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要精確判斷是否漏管，用5mgml的BSA離心10min，再取流穿，跑蛋白膠或Bradford粗測，繼續(xù)加入剩下的蛋白液濃縮，直到所有濃縮液都加完為止。離心過程中注意是否發(fā)生蛋白沉淀，導(dǎo)致堵管。若發(fā)生沉淀，要確定沉淀的具體原因，是蛋白濃度過高還是Buffer不合適；前者可用多根超濾離心管同時超濾，降低濃度的辦法解決，后者的方法是換不同的緩沖溶液，直到蛋白不發(fā)生沉淀為止。
前面幾步用以濃縮蛋白，如果要換Buffer，在總蛋白液濃縮至1ml左右的時候，輕輕加入新的Buffer，再濃縮至1ml左右，連續(xù)三次，后一次的濃縮終體積根據(jù)需要的蛋白濃度而定，一般不多于500ul，也有濃縮至200ul以內(nèi)的情況。按照每次至少10倍左右的體積濃縮算，三次達(dá)到1000倍以上，基本上可以達(dá)到換buffer的目的。
江蘇綠盟科學(xué)儀器有限公司主營產(chǎn)品：滅菌-無菌微孔濾膜-針頭式過濾器廠家
化工儀器網(wǎng) 設(shè)計制作，未經(jīng)允許翻錄必究.Copyright(C) http://true-witness.com, All rights reserved.
以上信息由企業(yè)自行提供，信息內(nèi)容的真實性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé)，化工儀器網(wǎng)對此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。 溫馨提示：為規(guī)避購買風(fēng)險，建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。
