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以下是一個(gè)關(guān)于小鼠肺成纖維細(xì)胞永生化細(xì)胞(以下簡(jiǎn)稱為MLF細(xì)胞)的應(yīng)用案例,以及相應(yīng)的數(shù)據(jù)說明。該細(xì)胞來源于南京賽泓瑞生物科技有限公司。
應(yīng)用案例名稱:Idiopathic Pulmonary Fibrosis (IPF) Disease Model and Drug Screening Platform
一、應(yīng)用案例概述
MLF細(xì)胞被用于建立一個(gè)特發(fā)性肺纖維化(IPF)疾病模型,并在此基礎(chǔ)上開發(fā)了一個(gè)藥物篩選平臺(tái)。該平臺(tái)旨在研究IPF的病理機(jī)制,并篩選出潛在的治療藥物。
二、應(yīng)用案例詳細(xì)說明
疾病模型建立
(1)細(xì)胞培養(yǎng):MLF細(xì)胞在含有10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基中培養(yǎng),并在37°C、5% CO2的環(huán)境下維持。
(2)模型誘導(dǎo):通過向培養(yǎng)基中添加TGF-β1(轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1)和血清饑餓處理來誘導(dǎo)MLF細(xì)胞發(fā)生纖維化改變。
數(shù)據(jù)說明
(1)細(xì)胞增殖與形態(tài)變化數(shù)據(jù):
培養(yǎng)第0天:MLF細(xì)胞呈典型的紡錘形,細(xì)胞密度為1×10^4 cells/cm2。
培養(yǎng)第7天:在TGF-β1誘導(dǎo)下,細(xì)胞形態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)樗笮?,?xì)胞密度增加到1.5×10^4 cells/cm2。
(2)纖維化標(biāo)志物表達(dá)數(shù)據(jù):
α-SMA(平滑肌肌動(dòng)蛋白):誘導(dǎo)前表達(dá)量為10 ng/mL,誘導(dǎo)后表達(dá)量增加到45 ng/mL。
Collagen I(膠原蛋白I):誘導(dǎo)前表達(dá)量為20 ng/mL,誘導(dǎo)后表達(dá)量增加到80 ng/mL。
藥物篩選
(1)篩選流程:將不同濃度的候選藥物與TGF-β1共同作用于MLF細(xì)胞,觀察藥物對(duì)纖維化進(jìn)程的影響。
(2)數(shù)據(jù)說明:
藥物名稱:Fibrostatin-1
濃度范圍:1 nM - 100 μM
篩選結(jié)果:Fibrostatin-1在10 μM濃度下顯著抑制α-SMA和Collagen I的表達(dá)(P<0.05),并減少細(xì)胞外基質(zhì)的沉積。
三、應(yīng)用優(yōu)勢(shì)
高度相關(guān)性:MLF細(xì)胞來源與小鼠肺成纖維細(xì)胞,與人類IPF疾病模型具有較高的相關(guān)性。
可重復(fù)性:永生化細(xì)胞系可以無限傳代,保證了實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性和穩(wěn)定性。
高效篩選:通過該平臺(tái),研究人員可以快速篩選出具有抗纖維化潛力的候選藥物。
四、合作單位
南京賽泓瑞生物科技有限公司:提供高質(zhì)量的MLF細(xì)胞,確保疾病模型和藥物篩選的可靠性。
五、應(yīng)用場(chǎng)景
藥物研發(fā)企業(yè):用于新藥篩選和機(jī)制研究。
醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室:研究IPF的病理機(jī)制。
生物科技公司:開發(fā)用于IPF診斷和治療的產(chǎn)品。
通過以上應(yīng)用案例和數(shù)據(jù)說明,MLF細(xì)胞在IPF疾病模型建立和藥物篩選中展現(xiàn)了其重要價(jià)值,為相關(guān)疾病的研究和治療提供了有力的實(shí)驗(yàn)工具。
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