| 貨號： | CM-6053G |
| 供應商： | 上海淳麥 |
| 數(shù)量： | 1000只 |
| 英文名： | DH5αChemically Competent Cell |
| 保質(zhì)期： | 1年 |
| 保存條件： | 零下80度 |
| 規(guī)格： | 20*100ul |
GV3101農(nóng)桿菌感受態(tài)細胞
GV3101 Chemically Competent Cell
產(chǎn)品編碼： 保存條件： -80℃
產(chǎn)品規(guī)格:
| GV3101 | 20×100μl |
| pCAMBIA2301（control vector） | 10ng/ul 10ul |
GV3101農(nóng)桿菌感受態(tài)細胞基因型：
C58 (rif R) Ti pMP90 (pTiC58DT-DNA) ( gentR/strepR) Nopaline
GV3101農(nóng)桿菌感受態(tài)細胞簡要說明：
GV3101菌株為C58型背景，核基因中含有篩選標簽——利福平抗性基因rif，為了便于轉(zhuǎn)化操作，此菌株攜帶一無自身轉(zhuǎn)運功能的胭脂堿型Ti質(zhì)粒pMP90 (pTiC58DT-DNA)，此質(zhì)粒含有vir基因（vir基因是T-DNA插入植物基因組必需的元件，pMP90 (pTiC58DT-DNA)質(zhì)粒自身的T-DNA轉(zhuǎn)移功能被破壞，但可以幫助轉(zhuǎn)入的雙元載體T-DNA順利轉(zhuǎn)移）。
pMP90 (pTiC58DT-DNA)型Ti 質(zhì)粒含有篩選標簽：Strep和gent，賦予GV3101菌株鏈霉素和慶大霉素抗性，適用于擬南芥、煙草、玉米、土豆等植物的轉(zhuǎn)基因操作，經(jīng)pCAMBIA2301質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率可達104cfu/μg。
GV3101農(nóng)桿菌感受態(tài)細胞操作說明：
- 取-80℃保存的農(nóng)桿菌感受態(tài)于冰上待其部分融化，處于冰水混合狀態(tài)時插入冰中。
- 每100μl感受態(tài)加1ug（體積不大于10ul）質(zhì)粒DNA，用手管底混勻，依次于冰上靜置5分鐘、液氮5分鐘、28℃水浴5分鐘、冰浴5分鐘。
- 加入700μl無抗生素的LB或YEB液體培養(yǎng)基，于28℃振蕩培養(yǎng)2~3小時。
4. 6000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應抗生素的LB或YEB平板上，倒置放于28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)2-3天（當平板只含有50ug/ml kan 時，28℃培養(yǎng)48h即可；平板中同時加入50ug/ml kan，20ug/ml rif 時，需28℃培養(yǎng)60h；如果使用的平板含有50ug/ml rif 則需要28℃培養(yǎng)72-90h）。
GV3101農(nóng)桿菌感受態(tài)細胞注意事項：
- 感受態(tài)細胞在冰上融化。
- 混入質(zhì)粒時應輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒可相應減少最終用于涂板的菌量。
GV3101農(nóng)桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細胞
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