JM109感受態(tài)細(xì)胞

JM109 Chemically Competent Cell
產(chǎn)品規(guī)格:

JM109感受態(tài)細(xì)胞基因型：
endA1 recA1 gyrA96 thi-1 hsdR17 (rk^-,mk⁺) relA1 supE44 D (lac-proAB) [F′traD36 proAB laqI^qZΔM15]
JM109感受態(tài)細(xì)胞簡(jiǎn)要說(shuō)明：
CMbio JM109菌株來(lái)源于E.coli K strain，是提取高質(zhì)量DNA的理想菌株，recA1 和 endA1 的突變有利于克隆DNA 的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒 DNA 的提取。攜帶 hsdR17基因型背景，使得異源DNA不被內(nèi)源核酸酶系統(tǒng)降解。laqI ^qZΔM15的存在使JM109可用于構(gòu)建克隆，藍(lán)白斑篩選實(shí)驗(yàn)；JM109感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作，經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率可達(dá)1×10⁹cfu/μg。
JM109感受態(tài)細(xì)胞操作說(shuō)明：

1. CMbio JM109感受態(tài)細(xì)胞放置冰中融化（或放手心或室溫片刻，待菌體處于冰水混合狀態(tài)時(shí)迅速插入冰中），加入目的DNA（質(zhì)粒或連接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻，冰上靜置25分鐘。

2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。

1.  向離心管中加入700μl不含抗生素的無(wú)菌培養(yǎng)基（2YT或LB），混勻后37℃，200rpm復(fù)蘇60分鐘。

4. 5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5. 將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)。
JM109感受態(tài)細(xì)胞注意事項(xiàng):

1.  CMbio 感受態(tài)細(xì)胞在冰上融化。
2.  混入質(zhì)粒或連接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?；蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少終用于涂板的菌量。