DH10Bac感受態(tài)細(xì)胞
DH10Bac Chemically Competent Cell

DH10Bac感受態(tài)細(xì)胞基因型：
F- mcrA (mrr-hsdRMS-mcrBC)  80lacZM15 lacX74 recA1 endA1 araD139 ? (ara,leu)7697 galU galK λ- rpsL nupG /pMON14272 / pMON7124
DH10Bac感受態(tài)細(xì)胞簡(jiǎn)要說(shuō)明：
CMbio DH10Bac感受態(tài)主要用于生產(chǎn)重組桿狀病毒分子（Bac-to-Bac桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)）。CMbio DH10Bac菌株中含有父本桿粒 bMON14272 、輔助質(zhì)粒 pMON7124 ：父本桿粒 bMON14272包含 mini-F復(fù)制子, 卡那抗性基因, attTn7 位點(diǎn)和 lacZα互補(bǔ)因子；輔助質(zhì)粒 pMON7124 含有 tnsABCD區(qū)（tnsABCD region supplies the transposition proteins required for insertion of the mini-Tn7 from the donor plasmid into its target site on the parent bacmid），具有四環(huán)素抗性，在細(xì)胞擴(kuò)增過(guò)程中丟失，但可提高供體質(zhì)粒pFastBac轉(zhuǎn)化后的基因轉(zhuǎn)座效率。mcrA、mcrBC及mrr突變使DH10Bac菌株適合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的DNA（Therefore , genomic DNA , both  prokaryotic and eukaryotic, can be cloned efficiently in DH10Bac）。recA1和endA1的突變有利于插入DNA的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提取。φ80dlacZ?M15的存在使DH10Bac可用于藍(lán)白斑篩選，CMbio High5^TM系列DH10Bac感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作，經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率>10⁸cfu/μg。
DH10Bac感受態(tài)細(xì)胞操作說(shuō)明：

1. CMbio DH10Bac感受態(tài)細(xì)胞放置冰中融化（或放手心或室溫片刻，待菌體處于冰水混合狀態(tài)時(shí)迅速插入冰中），加入目 的DNA（質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻，冰上靜置25分鐘。

2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。

1.  向離心管中加入700μl不含抗生素的無(wú)菌培養(yǎng)液（2YT或LB），混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。

4. 5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少13h。
DH10Bac感受態(tài)細(xì)胞注意事項(xiàng)：

1.  CMbio 感受態(tài)細(xì)胞在冰上融化。
2.  混入質(zhì)粒或連接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。