BL21感受態(tài)細胞

BL21 Chemically Competent Cell
產(chǎn)品編碼：                          保存條件： -80℃   
產(chǎn)品規(guī)格:

     
BL21感受態(tài)細胞基因型：
E. coli B F- dcm ompT hsdS(r_B- m_B-) gal [malB⁺]_K-12(λ^S)
BL21感受態(tài)細胞簡要說明：
 BL21是早開發(fā)的用于原核表達的菌株，BL21（DE3）、Rosetta、OrigamiB(DE3) 等一系列原核表達菌株均來源于BL21菌株。該菌株主要用于非毒性蛋白的表達，不含T7 RNA聚合酶，所以不能用于由T7啟動子驅(qū)動的蛋白表達(如：pET系列)；但含有大腸桿菌RNA聚合酶，可以用于tac或trc等使用大腸桿菌RNA聚合酶的原核系統(tǒng)的表達（如：pGEX，pMAL質(zhì)粒）。
 High5^TM系列 BL21感受態(tài)細胞由特殊工藝制作，經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率達10⁷cfu/μg。
 
BL21感受態(tài)細胞操作說明：

1.  取100μl冰上融化的BL21感受態(tài)細胞，加入目的質(zhì)粒并輕輕混勻，冰上靜置25分鐘。

2. 42℃水浴熱激90秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。

1.  向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基（2YT或LB），混勻后37℃，200rpm復(fù)蘇60分鐘。

4. 5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5. 將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。
BL21感受態(tài)細胞注意事項：

1.   感受態(tài)細胞在冰上融化。
2.  混入質(zhì)粒時應(yīng)輕柔操作。
3.  轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?？上鄳?yīng)減少終用于涂板的菌量。
4.  誘導(dǎo)時，IPTG濃度可選（0.1-2mM均可）。