XL2-Blue感受態(tài)細(xì)胞

XL2-Blue Chemically Competent Cell
產(chǎn)品規(guī)格:

XL2-Blue感受態(tài)細(xì)胞基因型：
Tet^RΔ(mcrA)183 Hte[F′{proAB lacIq lacZM15Tn10(Tet^R)AmyCam^R}](mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44thi-1 recA1 gyrA96 relA1
XL2-Blue感受態(tài)細(xì)胞簡(jiǎn)要說明：
 XL2-Blue菌株來源于XL1-Blue菌株，為Hte(high transformation efficiency)基因型，Hte是Stratagene開發(fā)的特異性提高感受態(tài)轉(zhuǎn)化效率及大質(zhì)粒轉(zhuǎn)化能力的宿主菌基因型，已成功應(yīng)用于40kd質(zhì)粒的構(gòu)建。Hte使得XL2-Blue適用于大質(zhì)粒DNA和重組產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化，降低片段大小的偏愛性，多用于文庫構(gòu)建。recA1和endA1的突變有利于插入DNA的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提取。
hsdSMR突變導(dǎo)致EcoK核酸內(nèi)切酶系統(tǒng)缺失，增強(qiáng)了外源DNA的穩(wěn)定性和提取質(zhì)量。 lacZΔM15 的存在使XL2-Blue菌株可用于藍(lán)、白斑篩選。此菌株具有四環(huán)素和氯霉素抗性。XL2-Blue感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作，經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率>1×10⁹cfu/μg。
XL2-Blue感受態(tài)細(xì)胞操作說明：

1. CMbio XL2-Blue感受態(tài)細(xì)胞放置冰中融化（或放手心或室溫片刻，待菌體處于冰水混合狀態(tài)時(shí)迅速插入冰中），加入目的DNA（質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻，冰上靜置25分鐘。

2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。

1.  向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基（2YT或LB），混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。

4. 5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少14h。
XL2-Blue感受態(tài)細(xì)胞注意事項(xiàng)：

1.  感受態(tài)細(xì)胞在冰上融化。
2.  混入質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。

3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?；蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少終用于涂板的菌量。