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當(dāng)前位置:上海淳麥生物科技有限公司> 供求商機> 6T-CEM,人T細胞白血病細胞
細胞名稱:6T-CEM,人T細胞白血病細胞 種屬來源:人 組織來源:T淋巴細胞 細胞形態(tài):淋巴母細胞樣 生長特性:懸浮生長 培養(yǎng)基: RPMI-1640+10% FBS+PS。 生長條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃ 傳代方法:1:2至1:3,每周 3次 凍存條件:無血清凍存液,液氮儲存 支原體檢測:無 6T-CEM,人T細胞白血病細胞培養(yǎng)操作 1)復(fù)蘇細胞:將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0 cm皿中,加入約8 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。 2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。 方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例; a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,加 1 mL血清重懸細胞,進行細胞計數(shù)。 b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液,使細胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。 c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
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