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GL-261-LUC(小鼠膠質(zhì)細(xì)胞瘤 標(biāo)記)
  • GL-261-LUC(小鼠膠質(zhì)細(xì)胞瘤 標(biāo)記)
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貨物所在地:上海上海市

地: 上海

更新時間:2024-09-05 21:00:22

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GL-261-LUC(小鼠膠質(zhì)細(xì)胞瘤-熒光素酶標(biāo)記) 上海淳麥生物科技有限公司是一家專注于研發(fā)和生產(chǎn)免疫細(xì)胞及干細(xì)胞相關(guān)產(chǎn)品的生物高科技企業(yè),致力于打造國內(nèi)原代細(xì)胞研發(fā)和服務(wù)平臺,做“您身邊的細(xì)胞培養(yǎng)專家“。產(chǎn)品涵蓋免疫細(xì)胞及干細(xì) 胞、細(xì)胞系、*培養(yǎng)基、無血清培養(yǎng)基、基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清、轉(zhuǎn)染試劑、胰酶等細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)品。
一、細(xì)胞基本屬性
細(xì)胞名稱GL-261-LUC(小鼠膠質(zhì)細(xì)胞瘤-熒光素酶標(biāo)記)
細(xì)胞別稱GL-261-LUC;小鼠膠質(zhì)細(xì)胞瘤-熒光素酶標(biāo)記
種屬來源小鼠
組織來源膠質(zhì)瘤
生長特性貼壁生長
細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣
細(xì)胞代數(shù)10代以內(nèi)
細(xì)胞規(guī)格1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測
培養(yǎng)基

87%DMEM+10% FBS+1%GlutaMAX-1谷氨酰胺+1%HEPES 1M Buffer solution+PS

培養(yǎng)條件氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
凍存條件無血清凍存液,液氮儲存
細(xì)胞貨期現(xiàn)貨,1周左右
運輸方式復(fù)蘇發(fā)貨(T25瓶免運輸費用)/凍存發(fā)貨(需加干冰運輸費用) 順豐快遞
供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
特別說明以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主
 二、細(xì)胞培養(yǎng)操作
收貨方式T25瓶凍存管
收貨處理觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁,將T25瓶置于37度培養(yǎng)箱放置2-4h,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)收到細(xì)胞后,需立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復(fù)蘇
傳代密度細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)第三天換液并檢查細(xì)胞密度
傳代比例 傳代建議1:2傳代
1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿
一管細(xì)胞建議接種到10cm培養(yǎng)皿或者T25瓶
傳代方法a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02% EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細(xì)胞,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1 -3min(視細(xì)胞消化情況而定),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml*培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。

c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6 cm皿中,加入約4 mL*培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第三天換液并檢查細(xì)胞密度。
注意事項
1.運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。
2.因運輸問題,部分細(xì)胞由于溫度變化及 死亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。
1.收貨時若發(fā)現(xiàn)干冰化完,檢查凍存管是否融化,若已融化需直接離心細(xì)胞接種觀察,若未融化可以將細(xì)胞按正常步驟保存;
2.為保證細(xì)胞的高存活率,收到產(chǎn)品后,請立即解凍復(fù)蘇細(xì)胞。
到貨須知
1.收到細(xì)胞后,首先觀察并拍照記錄細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,干冰運輸?shù)募?xì)胞檢查干冰是否*揮發(fā),細(xì)胞是否解凍,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2.靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照(當(dāng)天以及第 2,3 天請拍照),記錄細(xì)胞狀態(tài) (所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。

3.由于運輸?shù)脑?,個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。      
4.仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

 三、細(xì)胞凍存操作
凍存液配方無血清凍存液,液氮儲存
細(xì)胞密度待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例
凍存方法a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。

b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5x10

6~1x107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。

c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

注意事項凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性,若有異常,及時調(diào)整實驗方案



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