檢測原理
試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被人抗環(huán)瓜氨酸肽抗體(CCP-Ab)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人抗環(huán)瓜氨酸肽抗體(CCP-Ab)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
操作注意事項
1.試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡60分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶,這屬于正?,F(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再使用。樣本在使用前也要在室溫平衡60分鐘。
2.實驗中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
3.預(yù)處理后的樣本無需稀釋,直接取10μL加樣即可。
4.嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
5.所有液體組分使用前充分搖勻。