口蹄疫病毒A型檢測(cè)試劑盒(實(shí)時(shí)熒光PCR法)
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產(chǎn)品名稱:口蹄疫病毒A型檢測(cè)試劑盒(實(shí)時(shí)熒光PCR法)規(guī)格分類:PCR-熒光探針法試劑盒
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)*。
用途:生化實(shí)驗(yàn),合成實(shí)驗(yàn)等試驗(yàn)。
【目的】
口蹄疫病毒A型檢測(cè)試劑盒(實(shí)時(shí)熒光PCR法)
本試劑盒適用于檢測(cè)病禽肺臟、*等組織、體液或淋巴結(jié)等標(biāo)本以及細(xì)胞培養(yǎng)液中禽傳染性支氣管炎病毒(AIBV)RNA,適用于禽傳染性支氣管炎病毒(AIBV)感染的輔助診斷及流行病學(xué)調(diào)查,其檢測(cè)結(jié)果僅供參考。
口蹄疫病毒A型檢測(cè)試劑盒(實(shí)時(shí)熒光PCR法)規(guī)格【原理】
本試劑盒用一對(duì)新城疫病毒特異性引物,結(jié)合一條特異性探針,用一步法熒光RT-PCR技術(shù)對(duì)新城疫病毒RNA進(jìn)行體外擴(kuò)增檢測(cè),用于臨床上對(duì)可疑感染者的病原學(xué)診斷。
【儲(chǔ)存條件】-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
【試劑規(guī)格及有效期】48 T/盒,有效期12個(gè)月。說明:不同批號(hào)的試劑組分不可交互使用。
【適用儀器】取得資格認(rèn)證的熒光定量PCR儀。
實(shí)驗(yàn)原理:
多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction, PCR)基本原理類似于DNA的天然復(fù)制過程,其特異性依賴于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物。PCR由變性、退火、延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成。
1. 模板DNA的變性:模板DNA經(jīng)加熱至93℃左右一定時(shí)間后,使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈,以便它與引物結(jié)合,為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備;
2. 模板DNA與引物的退火(復(fù)性):模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后,溫度降至55℃左右,引物與模板DNA單鏈的互補(bǔ)序列配對(duì)結(jié)合;
3. 引物的延伸:DNA模板-引物結(jié)合物在Taq DNA聚合酶的作用下,以dNTP為反應(yīng)原料,靶序列為模板,按堿基配對(duì)與半保留復(fù)制原理,合成一條新的與模板DNA 鏈互補(bǔ)的半保留復(fù)制鏈重復(fù)循環(huán)變性、退火、延伸三過程,就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈",而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。每完成一個(gè)循環(huán)需2~4分鐘, 2~3小時(shí)就能將待擴(kuò)增的目的基因擴(kuò)增放大幾百萬倍。