豬流感病毒H3N2亞型檢測(cè)試劑盒使用步驟

豬流感病毒H3N2亞型檢測(cè)試劑盒

根據(jù)H3N2亞型豬流感病毒(SIV)血凝素(hemagglutinin,HA)和神經(jīng)氨酸酶(neuraminidase,NA)基因保守序列,分別設(shè)計(jì)并合成了特異性引物和TaqMan MGB探針,利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)SIV。使用含有選定檢測(cè)序列的重組質(zhì)粒pMD18-H3HA、pMD18-N2NA標(biāo)準(zhǔn)品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,其相關(guān)系數(shù)分別為0.99015(H3HA)和0.99947(N2NA)。檢測(cè)結(jié)果顯示,該方法的敏感性可達(dá)100 copies/μL,除H3N2亞型SIV外,對(duì)H1亞型、H9亞型SIV以及豬傳染性胃腸炎病毒、豬流行性腹瀉病毒、豬瘟病毒、豬生殖與呼吸綜合征病毒和豬2型圓環(huán)病毒的檢測(cè)均為陰性,應(yīng)用該方法對(duì)實(shí)驗(yàn)室感染樣品進(jìn)行檢測(cè),其結(jié)果與病毒分離結(jié)果的符合率為95.83%。表明,該方法特異性強(qiáng)、重復(fù)性好,有望成為H3N2亞型SIV的一種特異、敏感、快速的定量檢測(cè)方法。