豬口蹄疫病毒3ABC蛋白抗體檢測試劑盒
用于檢測豬血清中的豬口蹄疫病毒3ABC非結(jié)構(gòu)蛋白抗體,用于區(qū)別臨床野毒感染豬和用滅活疫苗免疫的豬。
需自備的設備及試劑
微量移液器: 0.5μl~10μl、10μl~100μl、100μl~1000μl。 一次性移液器吸頭。 量筒:500ml。 96孔板酶標儀。 蒸餾水或去離子水。 洗瓶或洗板機。
樣品制備
取動物全血,按常規(guī)方法制備血清,要求血清清亮,無溶血。
注意事項
試劑盒使用前各試劑應平衡至室溫,使用前應搖勻,使用后放回2~8℃。 不同品種、不同批號試劑盒的試劑組分不得混用,使用試劑時應防止試劑污染。 底物和終止液對皮膚和眼可能有刺激性,使用時應該注意防護。 TMB(底物B液)不要暴露于強光和避免接觸氧化劑。 檢測板拆封后應避免受潮或沾水(未用完的抗原包被板加干燥劑放于自封袋中,并盡快置于2~8℃)。 所有廢棄物在丟棄之前應合理處理以免污染。 嚴格遵守操作說明可以獲得*的結(jié)果。操作過程中移液、定時和洗滌等的全部過程必須精確。 血清稀釋板為一次性用品,不得重復使用;血清稀釋板的*容量為300μl/孔。
操作步驟
取預包被的檢測板(根據(jù)樣品*,可拆開分次使用),將稀釋好的待檢血清取100μl加入到檢測板孔中。同時設陰性、陽性及空白對照各1孔,取陰性及陽性對照各100μl
分別加入反應孔中,空白對照僅加入100μl樣本稀釋液。輕輕振勻孔中樣品(勿溢出),
蓋上封板膜,置37℃溫育30分鐘。 小心揭開封板膜,甩掉板孔中的溶液,用洗滌液洗3次。每次用洗滌液注滿板孔(約350μl),靜置1分鐘后甩掉。洗滌3次后在干凈吸水紙上拍干。 每孔加酶結(jié)合物100μl,蓋上封板膜,置37℃溫育30分鐘。 小心揭開封板膜,甩掉板孔中的溶液,洗滌3次, 方法同2。切記*在干凈吸水紙上拍干。 每孔先加底物A液50μl、再加底物B液50μl,混勻、蓋上封板膜37℃閉光顯色10分鐘。 每孔加終止液50μl,使反應終止,10分鐘內(nèi)測定結(jié)果。
結(jié)果判定
以空白對照調(diào)零用酶標儀于450nm(630nm作參比波長)讀取吸光度A值。試驗成立的條件是陽性對照孔A450值大于或等于0.4,陰性對照孔A450值必須小于0.1。如果試驗無效,試驗中的操作值得懷疑,試驗應重做,并仔細檢察各組分。
樣品A450值大于0.15+陰性對照孔均值,判為陽性;樣品A450值小于0.15+陰性對照孔均值,判為陰性;如陰性對照孔均值小于0.05按0.05計算。
有效期
貯存方法: 2 - 8oC下貯存。
有效期: 12個月。