O型口蹄疫抗體檢測(cè)試劑盒

口蹄疫病毒（Foot-and-mouth disease virus, FMDV抗體檢O型口蹄疫病毒抗體，用于評(píng)估口蹄疫苗免疫狀況。

O型口蹄疫抗體檢測(cè)試劑盒ELISA法，在酶標(biāo)板條微孔上預(yù)包被口蹄疫病毒抗原。在試驗(yàn)中，加入稀釋后的待檢血清VP1單抗，樣本中的抗體阻斷了單抗與包被板上抗原的結(jié)合；經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶結(jié)合物；在微孔中加入TMB底物液，經(jīng)酶催化產(chǎn)生的藍(lán)色信號(hào)與樣本中的抗體含量成反比，加入終止液終止反應(yīng)后，用酶標(biāo)儀450nm波長(zhǎng)測(cè)定反應(yīng)孔中的吸光度A值。

組份

自備的設(shè)備及試劑

微量移液器：μμμμ2. 一次性移液器吸頭。

量筒：4. 96孔板酶標(biāo)儀。

6. 洗瓶或洗板機(jī)。

樣品制備

洗滌液的準(zhǔn)備

10倍稀釋。稀釋好的洗滌液可在4℃存放一周左右。

注意事項(xiàng)

，應(yīng)將試劑盒各組份放置室溫至少。

3. 底物和終止液對(duì)皮膚和眼可能有刺激性，使用時(shí)應(yīng)該注意防護(hù)。

5. 檢測(cè)板拆封后應(yīng)(未用完的抗原包被板加干燥劑放于自封袋中，并盡快置于2-8℃6. 所有廢棄物在丟棄之前應(yīng)合理處理以免污染。

8. 抗原包被板為一次性用品，不得重復(fù)使用；

操作步驟

每次試驗(yàn)均設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照2. 將樣品稀釋液按/孔加入到微孔反應(yīng)板內(nèi)，之后將待檢樣品血清按/孔加入孔內(nèi)并吹打混勻（移液器槍頭請(qǐng)勿混用）；

蓋上封板膜（可按實(shí)際需要自行裁剪），置4. 250ul，后甩去孔內(nèi)液體，以上步驟重復(fù)4-6次，*在干凈吸水紙上拍干。

每孔加酶結(jié)合物1. 4-6次, 方法同4。切記*在干凈吸水紙上拍干。

每孔加顯色液μ3. 50μl，使反應(yīng)終止，10分鐘內(nèi)測(cè)定結(jié)果。

結(jié)果判定

作參比波長(zhǎng)）讀取吸光度試驗(yàn)：

(N)OD值>0.5，同時(shí)陽(yáng)性對(duì)照(P)阻斷率>50%；

PI (阻斷率)=  1 —（樣品OD值 ÷ 陰性O(shè)D均值）

牛、羊樣本

PI≤45%則判斷為陰性。

PI(阻斷率)>35%則判斷為陽(yáng)性；

貯存方法 2 - 8oC下貯存。

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