產(chǎn)品簡介
QX200 Droplet Digital PCR (ddPCR™) 系統(tǒng)可對靶 DNA 或 RNA 分子進(jìn)行定量分析,適用于 EvaGreen 或基于探針的數(shù)字 PCR 應(yīng)用領(lǐng)域。
詳細(xì)介紹
QX200™ Droplet Digital™ PCR 系統(tǒng)
QX200 Droplet Digital PCR (ddPCR™) 系統(tǒng)可對靶 DNA 或 RNA 分子進(jìn)行定量分析,適用于 EvaGreen 或基于探針的數(shù)字 PCR 應(yīng)用領(lǐng)域。
優(yōu)點(diǎn)
準(zhǔn)確、靈敏的數(shù)字 PCR 解決方案,具有廣泛的應(yīng)用
靈活的數(shù)字 PCR 化學(xué)方法,已針對 TaqMan 水解探針和 EvaGreen 測定進(jìn)行優(yōu)化
靈活的測定設(shè)置,可通過擴(kuò)展實(shí)現(xiàn)高度的靈敏性或較大的通量
簡便而易用的工作流程,通量達(dá) 96 個樣品
QX200 Droplet Digital 技術(shù)的微滴劃分功能可減少擴(kuò)增效率和 PCR 抑制劑的影響
便捷的測定設(shè)計(jì),不需要標(biāo)準(zhǔn)曲線
查看 QX200 Droplet Digital PCR的性能。
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應(yīng)用領(lǐng)域
癌癥生物標(biāo)志研究和拷貝數(shù)變異分析
以的靈敏度和解析能力測量癌癥突變的變異程度、檢測稀有的 DNA 靶拷貝以及解析拷貝數(shù)變異狀態(tài)。
病原體檢測
采用極為精確的 QX200 系統(tǒng)對靶 DNA 或 RNA 分子中的細(xì)微變化進(jìn)行定量分析,從而檢測和監(jiān)測病原體。
新一代測序
無需使用標(biāo)準(zhǔn)曲線,直接對 NGS 庫執(zhí)行定量分析。
基因表達(dá)分析
對少量 mRNA 和 miRNA 的細(xì)微變化進(jìn)行可靠和可重復(fù)的檢測。
環(huán)境監(jiān)測
使用 QX200 系統(tǒng)可測試多種環(huán)境樣品,例如土壤和水。
食品檢測
采用經(jīng)過驗(yàn)證的 ddPCR 方法對轉(zhuǎn)基因生物體 (GMO) 進(jìn)行評估。
Droplet Digital PCR 技術(shù)和工作流程
QX200 Droplet Digital PCR 系統(tǒng)由兩個儀器(QX200 微滴生成儀和 QX200 微滴分析儀)及其相關(guān)的消耗品構(gòu)成。
QX200 液滴生成儀用于將 PCR 反應(yīng)生成 20,000 個納升大小的液滴。在使用熱循環(huán)儀進(jìn)行 PCR 后,QX200 微滴分析儀將逐個分析每個樣品中的液滴。微滴被吸入后,管路將分解乳化的液滴,并使它們依次通過一個雙色光學(xué)檢測系統(tǒng)。每次運(yùn)行多可處理 96 個樣品。系統(tǒng)將計(jì)算陽性和陰性微滴的數(shù)量,從而以數(shù)字格式對靶 DNA 進(jìn)行定量分析。此外,對于經(jīng)過 PCR 的液滴,還可以提取擴(kuò)增的產(chǎn)品以用于下游環(huán)節(jié),例如測序或克隆。
起始樣品大小,µl | 20 |
QX200 微滴生成儀容量 | 1–8 個樣品 |
每 20 µl 樣品的微滴數(shù) | 1–96 個樣品 |
樣品光源 | 發(fā)光二極管 |
樣品檢測 | 多像素光子計(jì)數(shù)器 |
檢測通道 | FAM (EvaGreen)、HEX (VIC) |
線性動態(tài)范圍 | 5 數(shù)量級 |
精度 | ±10% |
每個 96 孔板的液滴數(shù),百萬 | ~1.5 |
QX200 微滴生成儀尺寸(寬 x 深 x 高) | 28 x 36 x 13 cm (11 x 14 x 5") |
QX200 微滴分析儀尺寸(寬 x 深 x 高) | 66 x 52 x 29 cm (26 x 20 x 11") |
分別是1. Denaturation 2. Annealing of primers,3. Extension of primers。 所謂 Denaturing乃是將DNA加熱(至90~95℃)變性, 將雙股的DNA加熱后轉(zhuǎn)為單股DNA以做為復(fù)制的模板. 而Annealing 則是令 Primers于一定的溫度下(冷卻至55~60℃)附著于模板DNA兩端。 后在DNA聚合酶e.g. Taq-polymerase 的作用下(加熱至70~75℃)進(jìn)行引物的延長 Extension of primers及另一股的合成。
PCR的早設(shè)想核酸研究已有100多年的歷史,二十世紀(jì)60年代末、70年代初人們致力于研究基因的體外分離技術(shù),Korana于1971年早提出核酸體外擴(kuò)增的設(shè)想:“經(jīng)過DNA變性,與合適的引物雜交,用DNA聚合酶延伸引物,并不斷重復(fù)該過程便可克隆tRNA基因”。