如何避免液相色譜柱的損壞呢？
在液相色譜的使用中，我們會發(fā)現(xiàn)很多實驗室會面臨色譜柱頻繁損壞的問題。

損壞的來源
先來了解一下色譜柱的損壞來源于哪些方面：
1泵頭密封圈的磨損
2進樣閥轉子密封圈的磨損
3析出的緩沖鹽
4樣品中的復雜易吸附基質，柱壓過高等。
其實，在工作過程中大多數(shù)的顆粒物堵塞導致的色譜柱背壓升高問題是體現(xiàn)在柱頭堵塞。
而樣品的易吸附機制也可能會和柱前端的硅膠表面游離的硅醇基發(fā)生作用導致色譜柱背壓升高。
但是這種情況在較低的PH系統(tǒng)中會有所改變，因為較低的PH系統(tǒng)會降硅膠表面的硅醇基發(fā)生解離。
5柱效低
可能是色譜柱被污染、 過濾片部分堵塞、色譜柱內的死體積造成，
例如流動相pH值或者組成不適造成固定相損失。流動相變化快，造成固定相物理損壞，機械振動造成固定相產(chǎn)生裂縫，柱床收縮或干枯。也有可能是儀器連接的問題，認真檢查進樣器、檢測器、管路、保護柱和在線過濾器等是否連接好，也可能是色譜柱沒有平衡好， 進樣量過大等問題。
6重復性差、不出峰、回收率低
可能是色譜柱被污染，流動相p H值或者組成不適造成固定相損失 ，樣品溶劑不同或樣品本身不穩(wěn)定，固定相極性過強或者流動相極性過弱．或者發(fā)生非特異性吸附。也可能梯度實驗時平衡時間不足，溫度波動，流動相組成改變，樣品溶劑不同， 樣品穩(wěn)定性不好，方法的開發(fā)不好，緩沖液的酸堿度不合適或者緩沖能力不足。

防護措施

為了降色譜柱的損耗問題，我建議大家在使用色譜柱時可以做一些防護。例如：
1在液相系統(tǒng)中加入在線過濾器
在線過濾器的內顆粒空隙一般是0.5微米，對于UHPLC會選擇0.2微米空隙的在線過濾器。這個空隙尺寸和柱頭的過濾篩板尺寸接近或者略小。

不同公司的在線過濾器

所以，在線過濾器能夠有成果的阻擋來自樣品、泵頭密封墊、自動進樣器的轉子密封墊的顆粒物，以防柱頭過濾篩板的堵塞。

注意：但是對于低死體積的液相系統(tǒng)，在線過濾器的加入可能會導致系統(tǒng)死體積大峰展寬變嚴重的問題。而對于大多數(shù)的液相系統(tǒng)而言，色譜圖不會有太大變化。

2在柱子前端使用保護柱
保護柱有很多種，通用型、一體式、卡套式，但是它其實是一個和分析柱固定相相同的10-20mm的小柱子。

因為它具有和分析柱相同的內填料，所以保護柱可以阻擋顆粒物，還可以阻擋易吸附的樣品基質組分。

不同公司的保護柱

注意：由于保護柱中可能有大量的強保留組分，在用強溶劑清洗系統(tǒng)時請取下保護柱，以防這些強保留組分被洗脫進分析柱。保護柱如果出現(xiàn)吸附飽和也可能會對分離成果有影響。


3對樣品進行凈化處理
有一些液相的分析方法沒有明確標注樣品的凈化，但我希望大家在做分析時能夠考慮樣品的凈化，常用的方案是對樣品進行過濾。

色譜柱的儲存

在實際工作中，色譜柱的儲存也會影響柱子的使用壽命。那么對于色譜柱的儲存，也有以下建議：
短期儲存時
應該保存在接近常用的流動相條件下。并且，要把系統(tǒng)中的緩沖鹽、酸等移除。

長期儲存時
按照說明書的要求將色譜柱保存在對應的溶劑中，并且將色譜柱從系統(tǒng)中取下兩頭用堵頭堵死。