小鼠酪蛋白β(β-CN)ELISA試劑盒實驗使用說明書

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　　小鼠酪蛋白β(β-CN)ELISA試劑盒實驗使用說明書主要包括以下關鍵步驟和注意事項?：

　　?實驗準備?

　　試劑盒應保存在2-8℃條件下，使用前需室溫平衡20分鐘?。

　　準備必要的實驗器材，如酶標儀(450nm)、高精度加樣器及槍頭、37℃恒溫箱等?。

　　?樣本收集與處理?

　　血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管收集血液，3000轉離心10分鐘分離血清和紅細胞?。

　　血漿：采用EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝，3000轉離心30分鐘取上清?。

　　細胞上清液：3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物?。

　　組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎，3000轉離心10分鐘取上清?。

　　若樣本不及時檢測，應按一次用量分裝并凍存于-20℃?。

　　?實驗步驟?

　　?加樣?：在酶標包被板上設定標準品孔、待測樣品孔和空白孔。標準品設定5個濃度點，每個濃度設定平行孔，加入50微升不同濃度的標準品;待測樣品孔先加樣品稀釋液40微升，再加待測樣品10微升(最終稀釋度為5倍);空白孔加入50微升蒸餾水?。

　　?溫育?：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘?。

　　?配液?：將濃縮洗滌液按倍數(shù)稀釋后備用?。

　　?洗滌?：揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，重復5次，拍干?。

　　?加酶?：每孔(除空白孔外)加入酶標試劑50微升?。

　　?再次溫育?：操作同溫育步驟?。

　　?再次洗滌?：操作同洗滌步驟?。

　　?顯色?：每孔先加入顯色劑A50微升，再加入顯色劑B50微升，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘?。

　　?終止?：每孔加終止液50微升，終止反應(顏色由藍轉黃)?。

　　?測定?：以空白孔調(diào)零，在450nm波長下依序測量各孔的吸光度(OD值)，測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行?。

　　?注意事項?

　　試劑盒僅用于科學研究，不得用于醫(yī)學診斷?。

　　實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封并低溫干燥保存?。

　　標準品稀釋液和濃縮洗滌液在使用前應確保溶解，避免結晶影響實驗結果?。

　　實驗過程中需嚴格遵守操作規(guī)程，確保實驗結果的準確性。

　　請根據(jù)實際使用的試劑盒品牌和說明書進行具體操作，如有差異請遵循產(chǎn)品說明書。