大鼠β2微球蛋白(BMG;β2-MG)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明書(shū)

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　　大鼠β2微球蛋白(BMG;β2-MG)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明書(shū)

　　一、產(chǎn)品基本信息

　　?產(chǎn)品名稱?：大鼠β2微球蛋白(BMG;β2-MG)ELISA試劑盒

　　?品牌與產(chǎn)地?：根據(jù)具體品牌與產(chǎn)地填寫(xiě)，如“本生生物，國(guó)產(chǎn)"

　　?型號(hào)與規(guī)格?：如48T/96T

　　?貨號(hào)?：BS-8542

　　?用途?：僅供科研使用，不得用于臨床診斷

　　?保存條件?：冷藏2-8°C

　　?有效期?：6個(gè)月

　　二、實(shí)驗(yàn)原理

　　本試劑盒采用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠β2微球蛋白(BMG;β2-MG)水平。用純化的大鼠β2微球蛋白(BMG;β2-MG)抗體包被微孔板，制成固相抗體。加入樣品后，樣品中的β2微球蛋白與固相抗體結(jié)合，再與HRP標(biāo)記的β2微球蛋白抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物。經(jīng)過(guò)洗滌后，加入底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色。顏色的深淺與樣品中的β2微球蛋白濃度呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值)，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中β2微球蛋白的濃度。

　　三、試劑盒內(nèi)容

　　試劑盒通常包含以下組分(具體數(shù)量與規(guī)格可能因品牌與規(guī)格而異)：

　　酶標(biāo)包被板

　　標(biāo)準(zhǔn)品及標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

　　酶標(biāo)試劑

　　樣品稀釋液

　　顯色劑A液與B液

　　終止液

　　濃縮洗滌液

　　封板膜與密封袋

　　說(shuō)明書(shū)

　　四、樣品收集與處理

　　?血清?：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。

　　?血漿?：使用EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

　　?尿液、胸腹水、腦脊液?：用無(wú)菌管收集，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。

　　?細(xì)胞培養(yǎng)上清?：檢測(cè)分泌性成分時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)成分時(shí)，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液，通過(guò)反復(fù)凍融使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成分，再離心收集上清。

　　?組織標(biāo)本?：切割標(biāo)本后稱重，加入一定量的PBS(PH7.4)，用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后保持2-8℃溫度，加入PBS勻漿，離心收集上清。

　　樣品收集后應(yīng)盡早進(jìn)行提取和實(shí)驗(yàn)。若不能立即實(shí)驗(yàn)，可將樣品分裝后保存于-20℃或更低溫度，避免反復(fù)凍融。

　　五、操作步驟

　　?準(zhǔn)備?：將所有試劑和組分恢復(fù)至室溫。

　　?加樣?：在酶標(biāo)包被板上設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、空白孔和樣本孔，加入相應(yīng)量的標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和稀釋液。

　　?溫育?：用封板膜封板后置37℃溫育一定時(shí)間(如30分鐘或60分鐘)。

　　?洗滌?：揭掉封板膜，棄去液體后洗滌，重復(fù)多次后拍干。

　　?加酶?：每孔加入酶標(biāo)試劑(除空白孔外)。

　　?再次溫育與洗滌?：重復(fù)溫育和洗滌步驟。

　　?顯色?：每孔加入顯色劑A和B，避光顯色一定時(shí)間(如15分鐘)。

　　?終止?：每孔加入終止液終止反應(yīng)。

　　?測(cè)定?：在酶標(biāo)儀上讀取各孔的吸光度(OD值)。

　　六、注意事項(xiàng)

　　?操作規(guī)范?：嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)操作，避免交叉污染和實(shí)驗(yàn)誤差。

　　?試劑保存?：試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存，不同批號(hào)的試劑不要混用。

　　?樣品處理?：樣品處理過(guò)程中應(yīng)避免溶血、高血脂等因素的干擾。

　　?結(jié)果解讀?：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品濃度，注意樣品的稀釋倍數(shù)。

　　?安全防護(hù)?：實(shí)驗(yàn)中應(yīng)做好個(gè)人防護(hù)，避免直接接觸有害試劑。

　　請(qǐng)注意，不同品牌與規(guī)格的大鼠β2微球蛋白(BMG;β2-MG)ELISA試劑盒在組分、操作步驟等方面可能有所不同，因此在使用前應(yīng)仔細(xì)閱讀具體產(chǎn)品的說(shuō)明書(shū)。