小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)ELISA試劑盒實驗使用說明書

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　　以下是關于小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)ELISA試劑盒的實驗使用說明：

　　BS-2216   小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)ELISA試劑盒

　　一、實驗原理

　　采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。預先包被sMHC-2捕獲抗體的微孔中依次加入標本、標準品和HRP標記檢測抗體，經(jīng)溫育洗滌后，通過TMB顯色反應測定吸光度(OD值)，顏色深淺與sMHC-2濃度呈正相關?。

　　二、試劑盒組成

　　微孔酶標板?：預包被抗體(96孔或48孔配置)

　　標準品?：濃度梯度溶液(通常0.3mL×6管)

　　檢測抗體-HRP?：辣根過氧化物酶標記物(10mL/5mL)

　　洗滌緩沖液?：20×濃縮液需稀釋使用?

　　顯色液?：底物A/B各3-6mL?

　　終止液?：酸性溶液(6mL/3mL)?

　　三、樣本處理

　　血清?：血液離心1000-3000×g 10分鐘，避免溶血?;

　　血漿?：EDTA/肝素抗凝，離心后取上清?;

　　組織勻漿?：按1:9比例加PBS勻漿，3000×g離心10分鐘?;

　　保存?：分裝凍存于-20℃，避免反復凍融?。

　　四、操作步驟

　　平衡?：取出板條室溫平衡20分鐘，剩余板條密封4℃保存?;

　　加樣?：

　　空白孔：不加樣

　　標準品孔：50μL不同濃度標準品

　　樣本孔：50μL待測樣本?;

　　孵育?：加入HRP檢測抗體100μL，37℃孵育60分鐘?;

　　洗滌?：用洗滌液洗板5次，拍干?;

　　顯色?：每孔加底物A/B各50μL，37℃避光反應15分鐘?;

　　終止?：加終止液50μL，15分鐘內(nèi)測450nm OD值?。

　　五、注意事項

　　有效期?：未開封試劑盒通常6個月(2-8℃保存)?;

　　線性范圍?：需按說明書標曲濃度操作，超出范圍可能導致誤差?;

　　應用限制?：僅限科研使用，不可用于臨床診斷?。

　　如需具體品牌試劑盒的完整說明書，可參考廠商提供的詳細文檔(如本生BS-2216或天正信達TZXD-2216?)。