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17次以下是關(guān)于大鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)使用說明綜合指南:
BS-3471 大鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA試劑盒
一、實(shí)驗(yàn)原理
采用雙抗體夾心法:用純化的大鼠sLR抗體包被微孔板形成固相抗體,依次加入樣本、HRP標(biāo)記的抗體,形成復(fù)合物后通過TMB顯色,顏色深度與樣本中sLR濃度正相關(guān)。
二、試劑盒組成
預(yù)包被微孔板?:含固相抗體
標(biāo)準(zhǔn)品?:濃度梯度通常為80、40、20、10、5、2.5 U/L
檢測(cè)抗體?:HRP標(biāo)記的sLR抗體
顯色底物?:TMB溶液
終止液?:酸性溶液(如2M H?SO?)
洗滌緩沖液?:PBS或TBS配方
三、樣本處理要求
樣本類型?:血清、血漿(肝素/EDTA抗凝)、組織勻漿液
采集注意事項(xiàng)?:
避免溶血,室溫血液凝固10-20分鐘后離心(2000-3000 rpm,20分鐘)
長(zhǎng)期保存需-20°C分裝,避免反復(fù)凍融
稀釋建議?:通常按1:5~1:20稀釋,高濃度樣本需進(jìn)一步稀釋
四、實(shí)驗(yàn)步驟
加樣?:
每孔加入50μL標(biāo)準(zhǔn)品或樣本,設(shè)雙復(fù)孔
孵育?:37°C溫育1小時(shí),洗滌3次
酶標(biāo)抗體結(jié)合?:加入HRP標(biāo)記抗體,37°C孵育30分鐘
顯色?:加入TMB底物避光反應(yīng)15分鐘
終止與檢測(cè)?:加終止液后15分鐘內(nèi)測(cè)450nm OD值
五、注意事項(xiàng)
質(zhì)量控制?:
每板需設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)曲線孔和質(zhì)控樣本
標(biāo)準(zhǔn)曲線R2應(yīng)≥0.99
操作規(guī)范?:
避免底物接觸金屬器械,終止液有腐蝕性需防護(hù)
開封后未用完板條需密封干燥保存
數(shù)據(jù)計(jì)算?:
以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo)繪制曲線,用四參數(shù)擬合計(jì)算樣本濃度
六、技術(shù)參數(shù)
檢測(cè)范圍?:通常2.5-80 U/L
靈敏度?:<1.0 U/L(不同品牌可能有差異)
批內(nèi)/批間差?:CV<10%
如需具體品牌(如天津本生、天正信達(dá)生物等)的差異說明,可進(jìn)一步提供補(bǔ)充信息。
天津本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護(hù)和拓展市場(chǎng),較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作,共創(chuàng)美好的未來。
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