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當(dāng)前位置:上?;菡\生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>PCR擴增儀的種類及用途
PCR擴增儀又稱為PCR基因擴增儀、PCR核酸擴增儀、聚合酶鏈反應(yīng)核酸擴增儀,是利用PCR(Polymerase chain reaction,聚合酶鏈反應(yīng))技術(shù)對特定DNA擴增的一種儀器設(shè)備,被廣泛運用于醫(yī)學(xué)、生物學(xué)實驗室中。
PCR擴增儀通常由熱蓋部件、熱循環(huán)部件、傳動部件、控制部件和電源部件等部分組成。
PCR技術(shù)的原理類似于DNA的天然復(fù)制過程,其特異性依賴于靶序列兩端互補的寡核苷酸引物,由變性-退火-延伸三個基本反應(yīng)步驟構(gòu)成。
1. 普通PCR儀
一次PCR擴增只能運行一個特定退火溫度的PCR儀稱作傳統(tǒng)PCR儀,也叫普通PCR儀。如果要做不同的退火溫度需要多次運行。主要是用于簡單的、對目的基因退火溫度的擴增。該儀器主要應(yīng)用于科學(xué)研究、教學(xué)、醫(yī)學(xué)臨床、檢驗檢疫等機構(gòu)。
2. 梯度PCR儀
一次性PCR擴增可以設(shè)置一系列不同的退火溫度條件(溫度梯度,通常有12種溫度梯度)的PCR儀稱作梯度PCR儀。因為被擴增的不同DNA片段,其適退火溫度是不同的,通過設(shè)置一系列的梯度退火溫度進行擴增,從而一次性PCR擴增,就可以篩選出表達量高的適退火溫度,進行有效的擴增。用于研究未知DNA退火溫度的擴增,這樣節(jié)約成本的同時也節(jié)約了時間。梯度PCR儀在不設(shè)置梯度的情況下也可以做普通PCR擴增。主要應(yīng)用于科研、教學(xué)機構(gòu)。
3. 原位PCR儀
用于從細胞內(nèi)靶DNA的定位分析的細胞內(nèi)基因擴增儀稱作原位PCR儀。如病源基因在細胞的位置或目的基因在細胞內(nèi)的作用位置等。是保持細胞或組織的完整性,使PCR反應(yīng)體系滲透到組織和細胞中,在細胞的靶DNA所在位置上進行基因擴增。不但可以檢測到靶DNA,又能標(biāo)出靶序列在細胞內(nèi)的位置,對于在分子和細胞水平上研究疾病的發(fā)病機理和臨床過程及病理的轉(zhuǎn)變有重大的實用價值。主要應(yīng)用于臨床、科研。
4. 實時熒光定量PCR儀
在普通PCR儀的基礎(chǔ)上增加一個熒光信號采集系統(tǒng)和計算機分析處理系統(tǒng)的PCR儀稱作熒光定量PCR儀。其PCR擴增原理和普通PCR儀擴增原理相同,只是PCR擴增時加入的引物是利用同位素、熒光素等進行標(biāo)記,使用引物和熒光探針同時與模板特異性結(jié)合擴增。擴增的結(jié)果通過熒光信號采集系統(tǒng)實時采集信號連接輸送到計算機分析處理系統(tǒng)得出量化的實時結(jié)果輸出。把這種PCR儀叫做實時熒光定量PCR儀(qPCR儀)。熒光定量PCR儀有單通道、雙通道和多通道。當(dāng)只用一種熒光探針標(biāo)記的時候,選用單通道,有多熒光標(biāo)記的時候用多通道。單通道也可以檢測多熒光的標(biāo)記的目的基因表達產(chǎn)物,因為一次只能檢測一種目的基因的擴增量,需多次擴增才能檢測完不同目的基因片段的量。主要用于醫(yī)學(xué)臨床檢測、生物醫(yī)藥研發(fā)、食品行業(yè)、科研院校等機構(gòu)。
PCR基因擴增儀的使用方法:
(1)首先準(zhǔn)備好反應(yīng)管;
(2)打開機蓋,將反應(yīng)管平穩(wěn)、端正地置入,蓋好機蓋;
(3)打開電源開關(guān),按照機器屏幕顯示的提示設(shè)定程序。
PCR擴增儀在實驗室中的作用:
PCR基因擴增儀采用專有的技術(shù),有效避免了熱傳導(dǎo)的邊緣效應(yīng)問題,為PCR實驗提供溫度均一性,確保實驗結(jié)果的可靠性和重復(fù)性,的溫控系統(tǒng),模式顯示金屬模塊的溫度變化,TUBE模式能模擬試管內(nèi)試劑的溫度變化,甚至考慮到了PCR反應(yīng)體系對溫度變化的影響,模塊具有溫度梯度功能,為前沿科研工作者提供30℃的溫度梯度范圍,滿足苛刻的優(yōu)化實驗需求。
PCR基因擴增儀不僅擁有30℃的寬限梯度功能,可用來優(yōu)化實驗條件,滿足苛刻的實驗需求,同時延續(xù)了“USB”和聯(lián)機聯(lián)網(wǎng)功能,PCR界產(chǎn)品的時尚,在之前基礎(chǔ)上,增加了LCD彩色觸摸屏,使實驗的顯示和操作更為清晰和直接。
PCR擴增儀的選購標(biāo)準(zhǔn):
實際上,PCR儀就是一個溫度變化控制的設(shè)備,因此一般來說,在選擇是的時候,溫度控制是首先需要考慮的,準(zhǔn)確控溫是PCR儀質(zhì)量好壞的關(guān)鍵,這其中就包括溫度準(zhǔn)確性、溫度均一性、升降溫速度等。
另外退火溫度也是影響PCR儀擴增特性的一個重要因素,在理想狀態(tài)下,退火溫度需要足夠低,以保證引物同目地序列有效結(jié)合,同時又需要足夠高,以減少引物與DNA片段的非特異性結(jié)合。
后一個標(biāo)準(zhǔn)就是儀器的耐用性。由于PCR實驗?zāi)壳耙呀?jīng)成為生命科學(xué)基礎(chǔ)研究和檢測實驗室常規(guī)的實驗方法,因此很多的實驗室中多需要開展大量的PCR實驗,這對于PCR儀是一個重要的考驗,需要該儀器有充分的耐用性來適應(yīng)頻繁的試驗過程。而影響儀器的使用壽命,如果不考慮維修的成本,則主要與半導(dǎo)體制冷片的壽命相關(guān)。
進口PCR儀和國產(chǎn)的PCR儀,在技術(shù)和使用性能上基本上沒有多大的差別,比如:升降溫速率,孔間溫差,溫度均一性,梯度溫度范圍,熱蓋溫度等性能指標(biāo),國內(nèi)外儀器基本達到了相同水平。PCR儀器的核心器件和技術(shù)為半導(dǎo)體及其溫控技術(shù),而現(xiàn)在大多數(shù)國產(chǎn)PCR廠家所用的都是進口的原核心配件。這就是為什么大多數(shù)PCR儀廠家的性能指標(biāo)基本雷同的原因!上?;菡\生物科技有限公司代理銷售眾多品牌PCR擴增儀,在選購時更傾向于向大家推薦國產(chǎn)經(jīng)濟實惠型,如果您在選購時需要技術(shù)支持,請聯(lián)系上?;菡\生物科技有限公司
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