PCR擴(kuò)增儀的種類及用途

PCR擴(kuò)增儀又稱為PCR基因擴(kuò)增儀、PCR核酸擴(kuò)增儀、聚合酶鏈反應(yīng)核酸擴(kuò)增儀，是利用PCR(Polymerase chain reaction，聚合酶鏈反應(yīng))技術(shù)對(duì)特定DNA擴(kuò)增的一種儀器設(shè)備，被廣泛運(yùn)用于醫(yī)學(xué)、生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室中。

PCR擴(kuò)增儀通常由熱蓋部件、熱循環(huán)部件、傳動(dòng)部件、控制部件和電源部件等部分組成。

PCR技術(shù)的原理類似于DNA的天然復(fù)制過(guò)程，其特異性依賴于靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物，由變性-退火-延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成。

PCR擴(kuò)增儀的常見(jiàn)分類：

1. 普通PCR儀

一次PCR擴(kuò)增只能運(yùn)行一個(gè)特定退火溫度的PCR儀稱作傳統(tǒng)PCR儀，也叫普通PCR儀。如果要做不同的退火溫度需要多次運(yùn)行。主要是用于簡(jiǎn)單的、對(duì)目的基因退火溫度的擴(kuò)增。該儀器主要應(yīng)用于科學(xué)研究、教學(xué)、醫(yī)學(xué)臨床、檢驗(yàn)檢疫等機(jī)構(gòu)。

2. 梯度PCR儀

一次性PCR擴(kuò)增可以設(shè)置一系列不同的退火溫度條件（溫度梯度，通常有12種溫度梯度）的PCR儀稱作梯度PCR儀。因?yàn)楸粩U(kuò)增的不同DNA片段，其適退火溫度是不同的，通過(guò)設(shè)置一系列的梯度退火溫度進(jìn)行擴(kuò)增，從而一次性PCR擴(kuò)增，就可以篩選出表達(dá)量高的適退火溫度，進(jìn)行有效的擴(kuò)增。用于研究未知DNA退火溫度的擴(kuò)增，這樣節(jié)約成本的同時(shí)也節(jié)約了時(shí)間。梯度PCR儀在不設(shè)置梯度的情況下也可以做普通PCR擴(kuò)增。主要應(yīng)用于科研、教學(xué)機(jī)構(gòu)。

3. 原位PCR儀

用于從細(xì)胞內(nèi)靶DNA的定位分析的細(xì)胞內(nèi)基因擴(kuò)增儀稱作原位PCR儀。如病源基因在細(xì)胞的位置或目的基因在細(xì)胞內(nèi)的作用位置等。是保持細(xì)胞或組織的完整性，使PCR反應(yīng)體系滲透到組織和細(xì)胞中，在細(xì)胞的靶DNA所在位置上進(jìn)行基因擴(kuò)增。不但可以檢測(cè)到靶DNA，又能標(biāo)出靶序列在細(xì)胞內(nèi)的位置，對(duì)于在分子和細(xì)胞水平上研究疾病的發(fā)病機(jī)理和臨床過(guò)程及病理的轉(zhuǎn)變有重大的實(shí)用價(jià)值。主要應(yīng)用于臨床、科研。

4. 實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀

在普通PCR儀的基礎(chǔ)上增加一個(gè)熒光信號(hào)采集系統(tǒng)和計(jì)算機(jī)分析處理系統(tǒng)的PCR儀稱作熒光定量PCR儀。其PCR擴(kuò)增原理和普通PCR儀擴(kuò)增原理相同，只是PCR擴(kuò)增時(shí)加入的引物是利用同位素、熒光素等進(jìn)行標(biāo)記，使用引物和熒光探針同時(shí)與模板特異性結(jié)合擴(kuò)增。擴(kuò)增的結(jié)果通過(guò)熒光信號(hào)采集系統(tǒng)實(shí)時(shí)采集信號(hào)連接輸送到計(jì)算機(jī)分析處理系統(tǒng)得出量化的實(shí)時(shí)結(jié)果輸出。把這種PCR儀叫做實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀（qPCR儀）。熒光定量PCR儀有單通道、雙通道和多通道。當(dāng)只用一種熒光探針標(biāo)記的時(shí)候，選用單通道，有多熒光標(biāo)記的時(shí)候用多通道。單通道也可以檢測(cè)多熒光的標(biāo)記的目的基因表達(dá)產(chǎn)物，因?yàn)橐淮沃荒軝z測(cè)一種目的基因的擴(kuò)增量，需多次擴(kuò)增才能檢測(cè)完不同目的基因片段的量。主要用于醫(yī)學(xué)臨床檢測(cè)、生物醫(yī)藥研發(fā)、食品行業(yè)、科研院校等機(jī)構(gòu)。

PCR基因擴(kuò)增儀的使用方法：

(1)首先準(zhǔn)備好反應(yīng)管；

(2)打開機(jī)蓋，將反應(yīng)管平穩(wěn)、端正地置入，蓋好機(jī)蓋；

(3)打開電源開關(guān)，按照機(jī)器屏幕顯示的提示設(shè)定程序。

PCR擴(kuò)增儀在實(shí)驗(yàn)室中的作用：

PCR基因擴(kuò)增儀采用專有的技術(shù)，有效避免了熱傳導(dǎo)的邊緣效應(yīng)問(wèn)題，為PCR實(shí)驗(yàn)提供溫度均一性，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性和重復(fù)性，的溫控系統(tǒng)，模式顯示金屬模塊的溫度變化，TUBE模式能模擬試管內(nèi)試劑的溫度變化，甚至考慮到了PCR反應(yīng)體系對(duì)溫度變化的影響，模塊具有溫度梯度功能，為前沿科研工作者提供30℃的溫度梯度范圍，滿足苛刻的優(yōu)化實(shí)驗(yàn)需求。

PCR基因擴(kuò)增儀不僅擁有30℃的寬限梯度功能，可用來(lái)優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件，滿足苛刻的實(shí)驗(yàn)需求，同時(shí)延續(xù)了“USB”和聯(lián)機(jī)聯(lián)網(wǎng)功能，PCR界產(chǎn)品的時(shí)尚，在之前基礎(chǔ)上，增加了LCD彩色觸摸屏，使實(shí)驗(yàn)的顯示和操作更為清晰和直接。

PCR擴(kuò)增儀的選購(gòu)標(biāo)準(zhǔn)：

實(shí)際上，PCR儀就是一個(gè)溫度變化控制的設(shè)備，因此一般來(lái)說(shuō)，在選擇是的時(shí)候，溫度控制是首先需要考慮的，準(zhǔn)確控溫是PCR儀質(zhì)量好壞的關(guān)鍵，這其中就包括溫度準(zhǔn)確性、溫度均一性、升降溫速度等。

另外退火溫度也是影響PCR儀擴(kuò)增特性的一個(gè)重要因素，在理想狀態(tài)下，退火溫度需要足夠低，以保證引物同目地序列有效結(jié)合，同時(shí)又需要足夠高，以減少引物與DNA片段的非特異性結(jié)合。

后一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)就是儀器的耐用性。由于PCR實(shí)驗(yàn)?zāi)壳耙呀?jīng)成為生命科學(xué)基礎(chǔ)研究和檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室常規(guī)的實(shí)驗(yàn)方法，因此很多的實(shí)驗(yàn)室中多需要開展大量的PCR實(shí)驗(yàn)，這對(duì)于PCR儀是一個(gè)重要的考驗(yàn)，需要該儀器有充分的耐用性來(lái)適應(yīng)頻繁的試驗(yàn)過(guò)程。而影響儀器的使用壽命，如果不考慮維修的成本，則主要與半導(dǎo)體制冷片的壽命相關(guān)。

進(jìn)口PCR儀和國(guó)產(chǎn)的PCR儀，在技術(shù)和使用性能上基本上沒(méi)有多大的差別，比如：升降溫速率，孔間溫差，溫度均一性，梯度溫度范圍，熱蓋溫度等性能指標(biāo)，國(guó)內(nèi)外儀器基本達(dá)到了相同水平。PCR儀器的核心器件和技術(shù)為半導(dǎo)體及其溫控技術(shù)，而現(xiàn)在大多數(shù)國(guó)產(chǎn)PCR廠家所用的都是進(jìn)口的原核心配件。這就是為什么大多數(shù)PCR儀廠家的性能指標(biāo)基本雷同的原因！上海惠誠(chéng)生物科技有限公司代理銷售眾多品牌PCR擴(kuò)增儀，在選購(gòu)時(shí)更傾向于向大家推薦國(guó)產(chǎn)經(jīng)濟(jì)實(shí)惠型，如果您在選購(gòu)時(shí)需要技術(shù)支持，請(qǐng)聯(lián)系上?；菡\(chéng)生物科技有限公司