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◆硫酸葡聚糖DSS誘導腸炎模式動物的優(yōu)點
潰瘍性結腸炎(UC)是一種病因和發(fā)病機制尚不十分清楚的慢性腸道炎癥性疾病,建立適當?shù)慕Y腸炎動物模型對于研究UC的病因、發(fā)病機制以及新的治療方法具有重要意義。人們制作了多種動物模型對其進行研究,日本學者于1985年*應用硫酸葡聚糖制備了鼠UC模型,此后,硫酸葡聚糖造模廣泛用于篩選治療炎癥性腸病(IBD)的新方法和臨床前新藥物的開發(fā),也用于研究IBD的發(fā)病機制。其具備以下優(yōu)點:
DSS誘導的UC模型的病理改變與人類UC相似;
此模型既可以應用于UC急性期又可應用于慢性期的研究,使實驗能夠完整地進行;
制作簡便、經(jīng)濟、易于復制。
上海惠誠生物提供結腸炎造模用硫酸葡聚糖鈉DSS 4W(MW:36000-50000),及其他分子量的Dextran Sulfate,Na,分子量5000,40000等
葡聚糖硫酸鈉鹽MW:36000-50000
( Dextran sulfate sodium salt MW:36000-50000)
分子結構:
物理性質(zhì):白色或灰白色粉末
描 述:硫酸葡聚糖是葡聚糖的聚陰離子衍生物,由葡聚糖和氯huáng酸的酯化反應形成。其中含硫量約為17%,相當于葡聚糖分子的每個葡萄糖殘?zhí)侵衅骄?.9個硫酸基團。
重要用途:
·提高核酸雜交率 - 溶液中含10%的硫酸葡聚糖,DNA鏈的再退火率約增加10倍,這一現(xiàn)象進一步擴大了單鏈或雙鏈的探針與固定在膜上的DNA/RNA的雜交率。不僅如此,添加10%硫酸葡聚糖也許會增加隨機切割的雙鏈DNA探針與固定化核酸的雜交率,高達100倍。
·顯示免疫相關的活動:
(1)體液免疫的增強和抑制;
(2)B淋巴細胞的多克隆活化作用,甚至可以刺激未成熟的B細胞;
(3)胸腺細胞反應中,促使轉化成凝集素;
(4)抑制血液凝固和血小板聚集;
(5)增強血纖維蛋白溶解活性;
(6)增強/抑制細胞介導的免疫應答;
·沉淀低密度(LDL)和極低密度(VDLD)脂蛋白 - Mg2+存在的條件下,硫酸葡聚糖沉淀人血清中的低密度脂蛋白,上清液中留下高密度脂蛋白。利用硫酸葡聚糖的沉淀作用去除脂蛋白這一功能同樣可以用來純化其他材料,如β-2-糖蛋白。
·作為佐劑發(fā)揮作用;
溶解度:
溶于水(100mg/ml - 澄清或者輕微模糊的黃色溶液,高分子量的產(chǎn)品在水中的溶解度沒有低分子量強)。滅菌前水溶液應配成緩沖體系(如碳酸氫鈉),防止降解。
硫酸葡聚糖4W硫酸葡聚糖4W
◆參考方法:
方法一:
小鼠給予含50 g/L硫酸葡聚糖(葡聚糖硫酸鈉) 5000或40000的蒸餾水自由飲用7 d,出現(xiàn)體重減輕、腹瀉、血便等急性腸炎的表現(xiàn).病理學切片HE染色發(fā)現(xiàn)小鼠病變結腸腺體結構紊亂,黏膜和黏膜下單核細胞和多核細胞浸潤.DSS組病變腸段組織GSH表達較對照組明顯減少(2±0.6 vs 3.14±1.0,t = 3.95, P = 0.01<0.05),病變結腸分泌的IL-4明顯升高(38.7±4.7 vs 28.7±6.7,t = 3.16, P = 0.009<0.01),ifn-g輕度降低(p>0.05).
資料來源:《GSH在DSS誘導的小鼠實驗性腸炎中的作用》
方法二:
將分子量為50 00或40000的DSS溶于飲用水,配成3% DSS溶液,讓BALB/C小鼠自由飲用7d,建立小鼠急性結腸炎模型;②讓BALB/C小鼠自由飲用3% DSS溶液7d,然后飲用不含DSS蒸餾水14d,建立小鼠慢性結腸炎模型;模型建立成功的標志為飲用3% DSS 7 d后出現(xiàn)半稀便、腹瀉、大便隱血(+)和肉眼血便中的任一癥狀。
資料來源:《葡聚糖硫酸鈉致小鼠結腸炎模型的建立與評價》。
已有研究表明,不同分子量的DSS所誘導的病變特征不同,如用5000, 40 000和500 000的DSS喂養(yǎng)小鼠,結果典型病變只出現(xiàn)于5 000組和40000組,5 0000組的病變主要見于盲腸和上段結腸,此外,DSS結腸炎的嚴重度并不依賴于DSS攝入量,而是由DSS濃度決定,小鼠飲用的DSS量差別較小時不影響誘導出的結腸炎嚴重度。再次,不同種屬對于不同分子量的DSS的敏感度不一。
其它造模試劑:
糖尿病模型動物誘導劑——鏈脲佐菌素(Streptozocin; STZ)
過敏性皮炎誘發(fā)試劑——Biostir AD
腸癌模型動物誘導劑——偶氮甲烷(Azoxymethane)
炎癥模型動物誘導劑——λ-角叉菜膠(λ-Carrageenan)
哮喘,過敏性鼻模型動物誘導劑——炎卵清蛋白 (Ovalbumin)
肝損傷,肝衰竭模型動物誘導劑——D-氨基半乳糖(D- aminogalactose)
帕金森模型動物誘導劑——1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氫吡啶(MPTP),MPTP鹽酸鹽
胃腸炎癥動物模型——新型COX-1選擇抑制劑TFAP
動物模型飼料——肥胖、糖尿病、 骨質(zhì)疏松癥、高血壓、動脈粥樣硬化、代謝綜合癥、高脂飼料等
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