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◆硫酸葡聚糖DSS誘導(dǎo)腸炎模式動(dòng)物的優(yōu)點(diǎn)
潰瘍性結(jié)腸炎(UC)是一種病因和發(fā)病機(jī)制尚不十分清楚的慢性腸道炎癥性疾病,建立適當(dāng)?shù)慕Y(jié)腸炎動(dòng)物模型對(duì)于研究UC的病因、發(fā)病機(jī)制以及新的治療方法具有重要意義。人們制作了多種動(dòng)物模型對(duì)其進(jìn)行研究,日本學(xué)者于1985年*應(yīng)用硫酸葡聚糖制備了鼠UC模型,此后,硫酸葡聚糖造模廣泛用于篩選治療炎癥性腸病(IBD)的新方法和臨床前新藥物的開(kāi)發(fā),也用于研究IBD的發(fā)病機(jī)制。其具備以下優(yōu)點(diǎn):
DSS誘導(dǎo)的UC模型的病理改變與人類(lèi)UC相似;
此模型既可以應(yīng)用于UC急性期又可應(yīng)用于慢性期的研究,使實(shí)驗(yàn)?zāi)軌蛲暾剡M(jìn)行;
制作簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)、易于復(fù)制。
上海惠誠(chéng)生物提供結(jié)腸炎造模用硫酸葡聚糖鈉DSS 4W(MW:36000-50000),及其他分子量的Dextran Sulfate,Na,分子量5000,40000等
葡聚糖硫酸鈉鹽MW:36000-50000
( Dextran sulfate sodium salt MW:36000-50000)
分子結(jié)構(gòu):
物理性質(zhì):白色或灰白色粉末
描 述:硫酸葡聚糖是葡聚糖的聚陰離子衍生物,由葡聚糖和氯huáng酸的酯化反應(yīng)形成。其中含硫量約為17%,相當(dāng)于葡聚糖分子的每個(gè)葡萄糖殘?zhí)侵衅骄?.9個(gè)硫酸基團(tuán)。
重要用途:
·提高核酸雜交率 - 溶液中含10%的硫酸葡聚糖,DNA鏈的再退火率約增加10倍,這一現(xiàn)象進(jìn)一步擴(kuò)大了單鏈或雙鏈的探針與固定在膜上的DNA/RNA的雜交率。不僅如此,添加10%硫酸葡聚糖也許會(huì)增加隨機(jī)切割的雙鏈DNA探針與固定化核酸的雜交率,高達(dá)100倍。
·顯示免疫相關(guān)的活動(dòng):
(1)體液免疫的增強(qiáng)和抑制;
(2)B淋巴細(xì)胞的多克隆活化作用,甚至可以刺激未成熟的B細(xì)胞;
(3)胸腺細(xì)胞反應(yīng)中,促使轉(zhuǎn)化成凝集素;
(4)抑制血液凝固和血小板聚集;
(5)增強(qiáng)血纖維蛋白溶解活性;
(6)增強(qiáng)/抑制細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答;
·沉淀低密度(LDL)和極低密度(VDLD)脂蛋白 - Mg2+存在的條件下,硫酸葡聚糖沉淀人血清中的低密度脂蛋白,上清液中留下高密度脂蛋白。利用硫酸葡聚糖的沉淀作用去除脂蛋白這一功能同樣可以用來(lái)純化其他材料,如β-2-糖蛋白。
·作為佐劑發(fā)揮作用;
溶解度:
溶于水(100mg/ml - 澄清或者輕微模糊的黃色溶液,高分子量的產(chǎn)品在水中的溶解度沒(méi)有低分子量強(qiáng))。滅菌前水溶液應(yīng)配成緩沖體系(如碳酸氫鈉),防止降解。
硫酸葡聚糖4W硫酸葡聚糖4W
◆參考方法:
方法一:
小鼠給予含50 g/L硫酸葡聚糖(葡聚糖硫酸鈉) 5000或40000的蒸餾水自由飲用7 d,出現(xiàn)體重減輕、腹瀉、血便等急性腸炎的表現(xiàn).病理學(xué)切片HE染色發(fā)現(xiàn)小鼠病變結(jié)腸腺體結(jié)構(gòu)紊亂,黏膜和黏膜下單核細(xì)胞和多核細(xì)胞浸潤(rùn).DSS組病變腸段組織GSH表達(dá)較對(duì)照組明顯減少(2±0.6 vs 3.14±1.0,t = 3.95, P = 0.01<0.05),病變結(jié)腸分泌的IL-4明顯升高(38.7±4.7 vs 28.7±6.7,t = 3.16, P = 0.009<0.01),ifn-g輕度降低(p>0.05).
資料來(lái)源:《GSH在DSS誘導(dǎo)的小鼠實(shí)驗(yàn)性腸炎中的作用》
方法二:
將分子量為50 00或40000的DSS溶于飲用水,配成3% DSS溶液,讓BALB/C小鼠自由飲用7d,建立小鼠急性結(jié)腸炎模型;②讓BALB/C小鼠自由飲用3% DSS溶液7d,然后飲用不含DSS蒸餾水14d,建立小鼠慢性結(jié)腸炎模型;模型建立成功的標(biāo)志為飲用3% DSS 7 d后出現(xiàn)半稀便、腹瀉、大便隱血(+)和肉眼血便中的任一癥狀。
資料來(lái)源:《葡聚糖硫酸鈉致小鼠結(jié)腸炎模型的建立與評(píng)價(jià)》。
已有研究表明,不同分子量的DSS所誘導(dǎo)的病變特征不同,如用5000, 40 000和500 000的DSS喂養(yǎng)小鼠,結(jié)果典型病變只出現(xiàn)于5 000組和40000組,5 0000組的病變主要見(jiàn)于盲腸和上段結(jié)腸,此外,DSS結(jié)腸炎的嚴(yán)重度并不依賴(lài)于DSS攝入量,而是由DSS濃度決定,小鼠飲用的DSS量差別較小時(shí)不影響誘導(dǎo)出的結(jié)腸炎嚴(yán)重度。再次,不同種屬對(duì)于不同分子量的DSS的敏感度不一。
其它造模試劑:
糖尿病模型動(dòng)物誘導(dǎo)劑——鏈脲佐菌素(Streptozocin; STZ)
過(guò)敏性皮炎誘發(fā)試劑——Biostir AD
腸癌模型動(dòng)物誘導(dǎo)劑——偶氮甲烷(Azoxymethane)
炎癥模型動(dòng)物誘導(dǎo)劑——λ-角叉菜膠(λ-Carrageenan)
哮喘,過(guò)敏性鼻模型動(dòng)物誘導(dǎo)劑——炎卵清蛋白 (Ovalbumin)
肝損傷,肝衰竭模型動(dòng)物誘導(dǎo)劑——D-氨基半乳糖(D- aminogalactose)
帕金森模型動(dòng)物誘導(dǎo)劑——1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氫吡啶(MPTP),MPTP鹽酸鹽
胃腸炎癥動(dòng)物模型——新型COX-1選擇抑制劑TFAP
動(dòng)物模型飼料——肥胖、糖尿病、 骨質(zhì)疏松癥、高血壓、動(dòng)脈粥樣硬化、代謝綜合癥、高脂飼料等
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