Cas14a1核酸酶介紹與應用

Cas14a1核酸酶是一種內切核酸酶，其在tracrRNA:crRNA（或sgRNA）的引導下，特異結合并切割靶標ssDNA，且無需PAM位點。相比于其他的Cas蛋白，Cas14蛋白的分子量普遍較小（400-700AA），其中，上?；菡\生物提供的Cas14a1的分子量僅為為64.9 kd（含有3.4 k的N端標簽序列）。與Cas12類似，Cas14a1也可以結合靶標核酸并激活其ssDNA反式切割活性，從而被應用于靶標核酸的分子檢測。然而，與Cas12不同的是，Cas14a1只能結合ssDNA靶標，因此：經過擴增富集的靶標核酸需使用T7核酸外切酶進行處理，且其中一條擴增引物需要實驗磷硫?；揎椧源_保T7核酸外切酶僅切割其中一條鏈，從而留下ssDNA靶標鏈以用于Cas14a1介導的分子檢測。上海惠誠生物優(yōu)勢提供CRISPR基因編輯系列。

正對照反式切割結果：