無血清培養(yǎng)基的選擇

無血清培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)，提供了更方便的純化和下游加工處理以及更穩(wěn)定的性能。無血清培養(yǎng)基的選擇通常根據(jù)：(1)細胞或產(chǎn)物特異性; (2)細胞系對無血清培養(yǎng)基的適應性。

1、細胞或產(chǎn)物特異性

如果使用無血清培養(yǎng)基是為了促進一種特殊類型細胞的生長，那么這種選擇性是由培養(yǎng)基的選擇性決定的。例如，MCDB 153用于培養(yǎng)表皮角質(zhì)細胞，LHC-9用于培養(yǎng)支氣管上皮細胞，HITES用于培養(yǎng)小細胞肺癌細胞、MCDB130用于培養(yǎng)內(nèi)皮細胞等。

如果只是為了不用血清培養(yǎng)連續(xù)細胞系，如CHO細胞或雜交瘤細胞，從而減少細胞產(chǎn)物中含有濾過性毒素或血清蛋白的可能，那么這種選擇的范圍就會更廣，并有許多可供選擇。然而，可能有必要篩選不同廠家的商品，以確保：①細胞生長；②產(chǎn)物結構可以持；③不需要長的適應期；④到貨時間和價格可以接受。

當從創(chuàng)建者或細胞庫獲得一個細胞系的時候，他們會推薦合適的培養(yǎng)基，除非培養(yǎng)基無貨或與其他成分不匹配才需更換培養(yǎng)基。可能的話，最好還是用創(chuàng)建者推薦的培養(yǎng)基，因為它可能是確保該細胞系保持其特異性的唯(空格)一途徑?？蓞⒖急疚牡牟糠譄o血清培養(yǎng)基的適應性。

2、細胞系對無血清培養(yǎng)基的適應性

許多連續(xù)細胞系，如HeLa、CHO-K1或小鼠骨髓瘤可能可以適應缺乏血清的生長環(huán)境。適應過程常常是一個很長的選擇周期，此間只有細胞群體中的少數(shù)被選擇出來，因此在此選擇過程中確保細胞系的性質(zhì)不喪失是很重要的。如果是骨髓瘤細胞，其目的是用于制備雜交瘤；而如果是CHO細胞，則是用于轉(zhuǎn)染實驗，因此用無血清培養(yǎng)基的選擇培養(yǎng)必須在融合和轉(zhuǎn)染之前進行，使選擇過程中丟失特性的危險性降到最(空格)低。

適應無血清培養(yǎng)基通常要經(jīng)過幾次連續(xù)的傳代培養(yǎng)，在每次傳代時或傳代前，或根據(jù)適應的程度確定更換頻率，使血清濃度逐漸降低。一旦細胞在某一血清濃度條件下形成穩(wěn)定的增殖狀態(tài)，就可用更低濃度的血清將細胞傳代培養(yǎng)，直至穩(wěn)定的生長增殖再次形成，而后再次稀釋血清。

如果是懸浮培養(yǎng)，要計算活細胞的數(shù)量，根據(jù)活細胞的數(shù)量稀釋細胞懸液，此時需要保持的最(空格)低細胞濃度要比正常傳代培養(yǎng)所需的細胞濃度高一些。對于單層細胞培養(yǎng)，可在傳代培養(yǎng)的前幾天先降低培養(yǎng)基中的血清濃度，而后再用新的低濃度培養(yǎng)基進行傳代培養(yǎng)。在適應過程中，可能我要在培養(yǎng)基中添加一些已知的因子來代替血清。

對于那些在無血清培養(yǎng)基中生長的增殖細胞，加入血清有可能抑制其生長。生長因子， 如TGF-B能夠抑制上皮細胞的生長，EGF抑制A431細胞的生長。