硫酸葡聚糖鈉DSS(4W)誘導結腸炎實驗操作方法

葡聚糖硫酸鈉(Dextran Sulfate Sodium, DSS)是一種化學合成的多糖硫酸酯，主要由葡糖醛酸單位通過硫酸酯鍵連接而成。其分子式為[C6H7O6Na2O10S]n，分子量在5-500kDa之間。DSS本身對人體幾乎無毒，不能被結腸上皮細胞吸收，但是可以損傷結腸上皮細胞的緊密連接和基底膜，從而增加腸道滲透性，導致腸道菌群和其他抗原進入黏膜下層和體循環(huán)，激活免疫炎癥反應，誘導結腸炎癥狀。

硫酸葡聚糖鈉DSS 36000~50000(平均分子量4W) 是常用的一種結腸炎造模劑，可通過損傷結腸上皮細胞，誘導結腸炎癥狀，廣泛用于結腸炎動物模型的建立。

DSS 36000~50000(分子量4W) 誘導結腸炎主要特點如下:

1. 作用機制：DSS不能被結腸上皮細胞直接吸收，但可損傷上皮細胞緊密連接和基底膜,導致腸道滲透性增加，促進腸道菌群和抗原滲入，激活免疫系統(tǒng)，誘導炎癥反應。

2. 誘導結腸炎：給予適量DSS可以在小鼠等動物體內迅速誘導急性或慢性結腸炎癥狀,表現(xiàn)出典型的體重減輕、稀便、血便、貧血等，病理表現(xiàn)為結腸炎癥滲出和潰瘍。

3. 可控性：DSS誘導的結腸炎癥狀是可逆的，停止DSS治療后可自行愈合。DSS的濃度和給藥劑量可以控制結腸炎的嚴重程度，實現(xiàn)從輕度到高度急性甚至慢性炎癥的誘導。

4. 簡便高效：DSS造模簡單高效，相比之下，需要較長時間誘導的基因敲除等方法更加耗時費力。是結腸炎研究的理想工具。

DSS 36000~50000(平均分子量4W) 誘導結腸炎的典型方案:

1. DSS溶液：DSS粉末用蒸餾水配制成3-5%的溶液，于4°C保存。

2. 給藥方式：在飲用水中添加DSS溶液，使小鼠自由飲用。另外也可灌胃給藥。

3. DSS濃度和時間：3-5%DSS,5-10天,可誘導輕-中度結腸炎；2%DSS，3周左右，可誘導慢性結腸炎。濃度和時間可根據需要調整。

4. 評價指標：體重變化、稀便和血便評分、貧血、結腸組織病理學檢查等。

DSS 36000~50000(分子量4W) 誘導結腸炎的操作方法主要如下:

1. DSS溶液的配制：

- DSS粉末于室溫下加熱至全溶，或在60°C水浴中加熱溶解；也可使用磁力攪拌在室溫下溶解。

- 一般配制成3-5%的溶液，除菌過濾后4°C保存，2周內使用。

- 確保DSS完(空)全溶解，避免粉末殘留，影響實驗結果。

2. 給藥方式：

- 自由飲用：在飲用水中直接添加DSS溶液,供小鼠自由飲用。此法操作簡單，但DSS攝入量難以準確控制。

- 灌胃給藥：以所需DSS量重組為相應濃度的溶液，每天灌胃給藥1次。此法DSS攝入可控，但對小鼠的創(chuàng)傷較大。

3. DSS處理方案的選擇:

- 急性結腸炎：3-5%DSS,5-10天。可誘導中度至重度急性結腸炎。

- 慢性結腸炎：1-3% DSS,2-4周。通過低劑量長時間的刺激誘導慢性炎癥。

- 濃度和時間可根據研究需要調整，從輕度到高度炎癥都可實現(xiàn)。

4. 動物觀察和樣本收集:

- 日常觀察：體重、食欲、糞便狀況等。記錄DSS治療前后的變化。

- 末期處死：收集結腸組織、血液、糞便等樣本用于病理學檢查、生化指標測定等。

- 對照組設置：以PBS代替DSS治療的對照組動物，用于結果比較分析。

5. 結腸炎的評估：體重變化、DSS刺激前后的糞便評分、貧血測試、結腸病理學檢查(炎癥程度、潰瘍數(shù)等)。

常用誘導劑：

HB12089 2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)

HC86040 雨蛙素 Ceruletide

HC80476 半胱胺鹽酸鹽 2-Aminoethanethiol HCl, 用于十二指腸潰瘍造模

HS91679 ?；悄懰徕c水合物 Sodium taurocholate hydrate

HS81762 碘乙酸鈉 Sodium iodoacetate，可用于骨關節(jié)炎（OA）動物模型的建立

HT0056 脂多糖LPS Lipopolysaccharides 055:B5

HA1132 硫酸葡聚糖鈉DSS 36000~50000(結腸炎造模用葡聚糖硫酸鈉4W)