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初級(jí)會(huì)員 | 第7年

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腫瘤異種移植模型(PDX)和類(lèi)器官培養(yǎng)專(zhuān)用基質(zhì)膠

時(shí)間:2025/4/10閱讀:59
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在體內(nèi),基底膜是以細(xì)胞為基礎(chǔ)的薄層細(xì)胞外基質(zhì)?;|(zhì)膠是一種可溶性的基底膜制劑,這種基質(zhì)是從Engelbreth-HolmSwarm(EHS)小鼠肉瘤,一種富含細(xì)胞外基質(zhì)蛋白的腫瘤中抽提出來(lái)的。它的主要成分是層粘連蛋白,接著是膠原蛋白Ⅳ、硫酸乙酰肝素蛋白多糖和巢蛋白?;|(zhì)膠也含有轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β、 表皮生長(zhǎng)因子、類(lèi)胰島素生長(zhǎng)因子、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、組織纖溶酶原激活物和在EHS腫瘤中自然出現(xiàn)的其他生長(zhǎng)因子?;|(zhì)膠對(duì)正常和變換的錨定依賴型上皮樣細(xì)胞和其他細(xì)胞類(lèi)型的附著和分化是有效的。這些細(xì)胞類(lèi)型包括神經(jīng)元肝細(xì)胞支持細(xì)胞小雞晶狀體上皮細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì) 胞。在成年大鼠肝細(xì)胞血管內(nèi)皮細(xì)胞以及小鼠和人乳腺上皮細(xì)胞的三維細(xì)胞培養(yǎng)中,基質(zhì)膠會(huì)影響基因 的表達(dá)。這是幾種類(lèi)型腫瘤細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ),支持體內(nèi)末梢神經(jīng)再生,并提供體外和體內(nèi)血管再生研究的必需底物?;|(zhì)膠也支持免疫抑制小鼠中體內(nèi)人類(lèi)腫瘤的增殖?;|(zhì)膠能用于未分選乳腺細(xì)胞的移植以及分選的上皮細(xì)胞亞群嵌入基質(zhì)膠。這一基質(zhì)也被作為癌癥干細(xì)胞模型并被證明能在體內(nèi)增強(qiáng)腫瘤生長(zhǎng)速率。


基質(zhì)膠的主要成分:


1. 層粘連蛋白(Laminin):這是基質(zhì)膠中含量最高的成分,是一種主要的基底膜糖蛋白,具有促進(jìn)細(xì)胞黏附、遷移和分化的功能。


2. IV型膠原(Collagen IV):這是另一種主要的結(jié)構(gòu)蛋白,有助于形成基底膜的支架。


3. 巢蛋白(Nidogen/Entactin):這是一種連接蛋白,能夠?qū)诱尺B蛋白和IV型膠原連接起來(lái),增強(qiáng)基底膜的穩(wěn)定性。


4. 硫酸肝素蛋白多糖(Heparan Sulfate Proteoglycans, HSPGs):如Perlecan,具有結(jié)合生長(zhǎng)因子和調(diào)節(jié)細(xì)胞行為的功能。


5. 生長(zhǎng)因子:基質(zhì)膠中含有多種生長(zhǎng)因子,如表皮生長(zhǎng)因子(EGF)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(TGF-β)、胰島素樣生長(zhǎng)因子(IGF)和成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF)等,這些因子能夠影響細(xì)胞的生長(zhǎng)、分化和血管生成。


6. 其他成分:還包括一些其他ECM蛋白、酶和生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白等。


基質(zhì)膠種類(lèi)


主要有常規(guī)標(biāo)準(zhǔn)型(Standard)、高濃度(HC)、無(wú)酚紅(Phenol red-free)、生長(zhǎng)因子減量型(Growth factor reduced, GFR)和人胚胎干細(xì)胞專(zhuān)用(hESC-qualified)幾個(gè)類(lèi)別。


? 標(biāo)準(zhǔn)型基質(zhì)膠:濃度范圍大致為 8-12mg/ml

? 高濃度基質(zhì)膠:濃度范圍大致為 18-22mg/ml

? 無(wú)酚紅基質(zhì)膠:不含酚紅,產(chǎn)品融化后顏色透明

? 生長(zhǎng)因子減量型基質(zhì)膠:基質(zhì)膠里包含的生長(zhǎng)因子經(jīng)過(guò)減量處理

? 人胚胎干細(xì)胞專(zhuān)用基質(zhì)膠:經(jīng)過(guò)對(duì) hESC 培養(yǎng)的測(cè)試,可以用于人胚胎干細(xì)胞的培養(yǎng)


基質(zhì)膠的主要用途:


1.細(xì)胞培養(yǎng):作為三維(3D)細(xì)胞培養(yǎng)的支架,模擬體內(nèi)細(xì)胞外基質(zhì)環(huán)境,促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)、分化和形態(tài)發(fā)生。


2.血管生成研究:用于體外或體內(nèi)血管生成實(shí)驗(yàn),評(píng)估血管生成抑制劑或促進(jìn)劑的效果。


3.腫瘤研究:用于研究腫瘤細(xì)胞的侵襲、轉(zhuǎn)移和血管生成。


4.干細(xì)胞研究:用于干細(xì)胞的培養(yǎng)和分化,模擬干細(xì)胞微環(huán)境。


使用注意事項(xiàng):


1.溫度敏感性:基質(zhì)膠在4°C時(shí)呈液態(tài),在室溫或37°C時(shí)會(huì)迅速凝結(jié)成凝膠狀。因此,在操作過(guò)程中需要保持低溫。


2.無(wú)菌操作:為了避免污染,所有操作需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行。


3.生長(zhǎng)因子含量:基質(zhì)膠中含有多種生長(zhǎng)因子,可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,因此需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪x擇合適的基質(zhì)膠類(lèi)型。

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