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總黃酮含量測(cè)試試劑盒(C002-96T 酶標(biāo)板法)

一.測(cè)定原理

黃酮中處于相鄰位的羰基、羥基可以共同絡(luò)合金屬而顯色。在中性或弱堿性及亞硝(空格)酸鈉存在條件下，黃酮類化合物與鋁鹽生成螯和物，加入堿溶液后顯紅橙色，在510nm處有大吸收峰。蘆丁是*的黃酮類化合物，常被用作標(biāo)準(zhǔn)品。

二.試劑組成

試劑一：無色液體2.5mL ×1瓶

試劑二：無色液體2.5mL ×1瓶

試劑三：顯色液 10mL ×1瓶

試劑四：1.0mg/mL蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液 200μL×1瓶

三.儲(chǔ)存條件及有效期

試劑一、試劑二4℃保存，試劑三-20℃保存，可保存3個(gè)月。

四.試劑的配制

試劑四應(yīng)用液：

移取50μL試劑四，加入450 μL雙蒸水，充分混勻，得到500 μL 濃度為100 μg/mL的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)液，分別采用移取0，20，40，60，80，100 μL于酶標(biāo)板中，加入100，80，60，40，20，0μL雙蒸水，得到0，20，40，60，80，100 μg/mL蘆丁標(biāo)準(zhǔn)液（試劑四應(yīng)用液）。

五.操作步驟

充分混勻，室溫靜置6min。

充分混勻，室溫靜置6min。

充分混勻，室溫靜置15min，以試劑空白調(diào)零，分光光度計(jì)510nm處測(cè)吸光值。

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