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產(chǎn)品簡(jiǎn)介 來(lái)自 S. pyogenes 的 Cas9 核酸酶是依賴(lài)于 RNA 介導(dǎo)的內(nèi)切核酸酶，可以特異地切割雙鏈 DNA（在 DNA PAM 存在的情況下，也可以切割單鏈 DNA 或單鏈 RNA）。Cas9 切割位點(diǎn)位于目標(biāo)序列 （target sequence）內(nèi)，離 PAM（NGG）區(qū) 3 個(gè)堿基。PAM 對(duì)于 Cas9 的識(shí)別和切割都是必需的。 因?yàn)榉磻?yīng)需要添加 RNA（sgRNA 或者 crRNA:tracrRNA），整個(gè)體系，包括 Cas9 酶都不能含有任 何 RNase 活性。其中，Cas9 中的 HNH 和 RuvC 結(jié)構(gòu)域分別負(fù)責(zé)切割靶標(biāo) DNA 中與 sgRNA 配對(duì)和 非配對(duì)的鏈。在本產(chǎn)品中，Cas9 的 H840 和 D10 都被突變?yōu)?A，使 Cas9 的 HNH 和 RuvC 結(jié)構(gòu)域均 失活，獲得 dCas9 蛋白。因此，dCas9 只有結(jié)合靶標(biāo) DNA 的活性，而沒(méi)有切割靶標(biāo) DNA 的活性。

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