細(xì)胞培養(yǎng)板作為培養(yǎng)細(xì)胞的一種常用和重要的工具，形狀、規(guī)格、用途多樣，你是否也為如何選擇適合的培養(yǎng)板而迷茫？你是否正為如何方便、正確的使用培養(yǎng)板而苦惱？你對如何處理培養(yǎng)板是否也有困惑？對不同的培養(yǎng)板各有什么妙用你又有何體會？

 

細(xì)胞培養(yǎng)板依底部形狀的不同可分為平底和圓底（U 型和V 型）；培養(yǎng)孔的孔數(shù)有 6、12、24、48、96、384、1536 孔等；根據(jù)材質(zhì)的不同有 Terasaki 板和普通細(xì)胞培養(yǎng)板。具體選擇時根據(jù)培養(yǎng)細(xì)胞的類型、所需培養(yǎng)體積及不同的實驗?zāi)康亩ā?/span>

 

平底和圓底（U型和V型）培養(yǎng)板的區(qū)別和選擇

 

不同形狀的板子自然有不同用途。平底的什么類型的細(xì)胞都可用，但當(dāng)細(xì)胞數(shù)目較少，如做克隆時，就用 96 孔平底板；另外，做 MTT 等實驗時，無論貼壁和懸浮細(xì)胞，一般均用平底板。這樣便于鏡下觀測、有明確的底面積、細(xì)胞培養(yǎng)液面高度相對一致，還便于 MTT 檢測。

 

至于 U 或 V 型板，一般在某些特殊要求時才使用。如在免疫學(xué)方面，當(dāng)做兩種不同淋巴細(xì)胞混合培養(yǎng)時，需要二者相互接觸以刺激。因此，一般需要 U 型板，因細(xì)胞會由于重力的作用而聚集在一個很小的范圍內(nèi)。V 型板的用途更少，一般用于細(xì)胞殺傷實驗時，為了使效靶細(xì)胞緊密接觸，常使用 V 型板，但這種實驗也可用 U 型板替代（加入細(xì)胞后﹐低速離心）。除此之外，圓底還可以拿來做分析、化學(xué)反應(yīng)、同位素?fù)饺氲膶嶒灮蚴潜４鏄悠酚谩?/span>

 

孔數(shù)的選擇

 

流式一般用 6 孔，MTT 一般用 96 孔，細(xì)胞爬片一般用 24 孔等，要具體根據(jù)你的實驗來定。

 

 

Terasaki 板和普通細(xì)胞培養(yǎng)板的區(qū)別

 

Terasakiplate 主要是用于晶體學(xué)研究，產(chǎn)品設(shè)計便于對晶體的觀察與結(jié)構(gòu)分析。有 sitting 和 handing drop 兩種方法。兩種方法應(yīng)用產(chǎn)品的外形結(jié)構(gòu)也不同，材料上選擇 crystal class polymer，特殊的材料有利觀察晶體結(jié)構(gòu)。

 

細(xì)胞培養(yǎng)板主要材料是 treated sufface，便于細(xì)胞貼壁生長與伸展。當(dāng)然還與浮游細(xì)胞的生長材料，降低結(jié)合表面積有關(guān)，取決于實驗材料上的應(yīng)用與對材料的選擇。

 

細(xì)胞培養(yǎng)板與酶標(biāo)板的區(qū)別

 

用多孔細(xì)胞培養(yǎng)板測吸光度肯定可以，可以用它來做樣品的蛋白定量和 MTT 檢測。

 

區(qū)別：酶標(biāo)板一般要比細(xì)胞培養(yǎng)板貴，細(xì)胞板主要做細(xì)胞培養(yǎng)，但也可以用來測蛋白濃度；酶標(biāo)板包括包被板和反應(yīng)板，一般不能用做細(xì)胞培養(yǎng)，它主要做免疫酶聯(lián)反應(yīng)后的蛋白檢測，它需要更高的要求還需要特定的酶標(biāo)工作液。

 

常用不同培養(yǎng)板的孔底面積及推薦加液量

 

不同孔板所加培養(yǎng)液的液面都不宜太深，一般在 2-3 mm 范圍，結(jié)合不同孔的底面積就可算出各培養(yǎng)孔的適宜加液量。若加液量過多會影響氣體（氧氣）交換，而且在搬動過程中易溢出造成污染。具體所加細(xì)胞密度依實驗的目的不同靈活掌握。

培養(yǎng)器皿	面積（cm2）	培養(yǎng)液量（ml）	細(xì)胞量
96 孔培養(yǎng)板	0.32	0.1	105
24 孔培養(yǎng)板	2	1.0	5×105
12 孔培養(yǎng)板	4.5	2.0	106
6 孔培養(yǎng)板	9.6	2.5	2.5×106
3.5 cm 培養(yǎng)皿	8	3.0	2×106
6 cm 培養(yǎng)皿	21	5.0	5.2×106
10 cm 培養(yǎng)皿	55	10.0	13.7×106
25 cm2 培養(yǎng)瓶	25	5.0	5×106
75 cm2 培養(yǎng)瓶	75	15～30	2×107