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常用的培養(yǎng)基有哪幾款?
閱讀:463 發(fā)布時間:2024-3-191、BME細胞培養(yǎng)基
基礎Eagle培養(yǎng)基(Basal Medium Eagle),1955年Eagle設計,BSS+12種氨基酸+谷氨酰胺+8種維生素。簡單、便于添加,適于各種傳代細胞系和特殊研究用,在此基礎上改良的細胞培養(yǎng)基品種有MEM、DMEM、IMDM等。
2、MEM細胞培養(yǎng)基
又稱Eagle培養(yǎng)基(Minimal Essential Medium),1959年在Eagle's基礎培養(yǎng)基(BME)上修改而來,刪去賴氨酸、生物素,氨基酸濃度增加,適合多種細胞單層生長,有可高壓滅菌品種,是一種最基本的培養(yǎng)基,但因其營養(yǎng)成分所限,針對生產之特定細胞培養(yǎng)與表達時,并不一定是使用效果或者經濟的培養(yǎng)基。
3、DMEM細胞培養(yǎng)基
DMEM是由Dulbecco改良的Eagle培養(yǎng)基,起初是為小鼠成纖維細胞設計的。DMEM的氨基酸濃度是MEM的兩倍,維生素濃度是MEM的4倍,采用雙倍的HCO3-和CO2濃度起到更好的緩沖作用。最初的配方中葡萄糖含量為1000 mg/L,后來為了某些細胞的生長需要,將葡萄糖含量又調整為4500 mg/L,這就是大家常說的低糖和高糖了。
低糖適于依賴性貼壁細胞培養(yǎng),特別適用于生長速度快、附著性較差的腫瘤細胞培養(yǎng)。高糖更適合高密度懸浮細胞培養(yǎng),也適用于附著性較差,但又不希望它脫離原來生長點的克隆培養(yǎng),也可用于雜交瘤中骨髓瘤細胞和DNA轉染的轉化細胞的培養(yǎng)。例如CHO細胞表達生產乙肝疫苗、CHO細胞表達EPO。
4、IMDM細胞培養(yǎng)基
Guilber 和Iscove將Dulbecco' Medium 改良為 Iscove's Medium,用于培養(yǎng)紅細胞和巨噬細胞前體。此種培養(yǎng)液含有硒、額外的氨基酸和維生素、丙酮酸鈉和HEPES。并用硝酸鉀取代了硝酸鐵。IMDM還能夠促進小鼠B淋巴細胞,LPS刺激的B細胞,骨髓造血細胞,T細胞和淋巴瘤細胞的生長。IMDM為營養(yǎng)非常豐富的培養(yǎng)液,因此可以用于高密度細胞的快速增殖培養(yǎng)。
5、RPMI-1640細胞培養(yǎng)基
Moore等人于1967年在Roswell Park Memorial Institute研制,針對淋巴細胞培養(yǎng)設計,含BSS+21種氨基酸+維生素11種等。現也用于懸浮細胞培養(yǎng),如哺乳動物、特殊造血細胞、正常或惡性增生的白細胞,雜交瘤細胞的培養(yǎng),其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴細胞、T細胞淋巴瘤細胞以及HCT-15上皮細胞等均可參考使用。