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ubiquigent脫輔基化酶-USP5簡述

閱讀:634      發(fā)布時間:2024-3-26
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目錄號:64-0002-050

產(chǎn)品大?。?/trans>50克

登錄號:P45974

表達(dá)的殘基:1-858

Certificate of Analysis Size50克

種類:人類

來源:E.大腸桿菌表達(dá)

量:50克

儲存:-70攝氏度

Concentration0.5毫克/毫升

制定:50 mM HEPES pH 7.5、150 mM氯化鈉、2 mM二硫蘇糖醇、10%甘油

分子量:約98千道爾頓

穩(wěn)定性:-70攝氏度下12個月;根據(jù)需要等分

蛋白質(zhì)序列:登錄號:P45974。有關(guān)完整的蛋白質(zhì)序列信息。

QA;蛋白質(zhì)鑒定:質(zhì)譜證實。

質(zhì)量保證活動:

去泛素化酶分析:通過測定熒光的增加來驗證His-USP5的活性,所述熒光的增加是酶催化熒光底物泛素-羅丹明110-甘氨酸產(chǎn)生泛素和羅丹明110-甘氨酸的結(jié)果。比較了His-USP5存在或不存在時底物的溫育,證實了His-USP5的去雙堿基化活性。


背景去泛素化酶(DUBs)調(diào)節(jié)泛素依賴性信號通路。DUBs的活動包括從前體分子產(chǎn)生游離泛素,在底物降解后再循環(huán)泛素以維持細(xì)胞泛素穩(wěn)態(tài),以及通過鏈編輯去除泛素或泛素樣蛋白(UBL)修飾以拯救蛋白質(zhì)免受蛋白酶體降解或影響細(xì)胞信號事件(Komander以及其他人。, 2009).有兩類主要的DUB,半胱氨酸蛋白酶和金屬蛋白酶。泛素特異性加工蛋白酶5(USP5)是半胱氨酸蛋白酶家族的成員,人類基因的克隆首先由Wilkinson描述以及其他人。(1995).USP5蛋白包含一個N末端鋅指泛素結(jié)合結(jié)構(gòu)域(ZNF-UBP)、一個泛素特異性加工蛋白酶(UBP)結(jié)構(gòu)域(包含活性位點cys和his盒)和兩個泛素相關(guān)結(jié)構(gòu)域(UBA1和uba 2)(Reyes-Turcu以及其他人。, 2006).ZNF-UBP結(jié)構(gòu)域的晶體結(jié)構(gòu)揭示了一個深的結(jié)合口袋,其中插入了泛素的C-末端二甘氨酸基序,這解釋了USP對多泛素近端亞基上未修飾的C-末端的特異性(Reyes-Turcu以及其他人。, 2006).最近,USP5被鑒定與26S蛋白酶體以及其他已知為UBL相互作用組(Besche)的蛋白質(zhì)相關(guān)以及其他人., 2009).

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