過表達(dá)慢病毒是一種基于慢病毒載體的基因傳遞系統(tǒng)。慢病毒是一類單鏈RNA病毒,其基因組可以整合到宿主細(xì)胞的染色體上,從而實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)期穩(wěn)定的基因表達(dá)。通過將目的基因克隆到慢病毒載體中,利用慢病毒的包裝質(zhì)粒和輔助質(zhì)粒共同轉(zhuǎn)染到包裝細(xì)胞中,經(jīng)過包裝、成熟和釋放等過程,獲得含有目的基因的慢病毒顆粒。這些慢病毒顆??梢愿腥舅拗骷?xì)胞,將目的基因整合到宿主細(xì)胞的染色體上,實(shí)現(xiàn)目的基因的過表達(dá)。制備方法如下:
1.目的基因的克?。盒枰獙⒛康幕蚩寺〉铰《据d體中。常用的慢病毒載體有pLenti6/V5-DEST、pLenti-CMV/TO-Puro-DEST等。將目的基因插入到慢病毒載體的多克隆位點(diǎn),構(gòu)建重組質(zhì)粒。
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