您好, 歡迎來(lái)到化工儀器網(wǎng)
尼康顯微鏡的幾種觀察技巧你都學(xué)會(huì)了嗎？
閱讀：2189 發(fā)布時(shí)間：2021-11-5
尼康顯微鏡主要分生命科學(xué)儀器和工業(yè)儀器兩種，其中：生命科學(xué)儀器包含正置生物顯微鏡、倒置生物顯微鏡、體視顯微鏡；于工業(yè)儀器包含正置金相顯微鏡、倒置金相顯微鏡、立體顯微鏡、偏光顯微鏡。
尼康顯微鏡的幾大觀察技巧如下：
1.明視野觀察
明視野鏡檢是大家比較熟悉的一種鏡檢方式，廣泛應(yīng)用于病理、檢驗(yàn)，用于觀察被染色的切片，所有顯微鏡均能完成此功能。
2.暗視野觀察
暗視野實(shí)際是暗場(chǎng)照明。它的特點(diǎn)和明視野不同，不直接觀察到照明的光線，而觀察到的是被檢物體反射或衍射的光線。因此，視場(chǎng)為黑暗的背景，而被檢物體則呈現(xiàn)明亮的像。
暗視野的原理是根據(jù)光學(xué)上的丁道爾現(xiàn)象，微塵在強(qiáng)光直射通過(guò)的情況下，人眼不能觀察，這是因?yàn)閺?qiáng)光繞射造成的。若把光線斜射它，由于光的反射，微粒似乎增大了體積，為人眼可見(jiàn)。暗視野觀察所需要的特殊附件是暗視野聚光鏡。它的特點(diǎn)是不讓光束由下至上的通過(guò)被檢物體，而是將光線改變途徑，使其斜射向被檢物體，使照明光線不直接進(jìn)入物鏡，利用被檢物體表面反射或衍射光形成的明亮圖像。暗視野觀察的分辨率遠(yuǎn)高于明視野觀察，最高達(dá)0.02-0.004μm。
3.相差鏡檢法
在光學(xué)顯微鏡的發(fā)展過(guò)程中，相差鏡檢法的發(fā)明成功，是近代顯微鏡技術(shù)中的重要成就。人眼只能區(qū)分光波的波長(zhǎng)(顏色)和振幅(亮度)。對(duì)于無(wú)色透明的生物標(biāo)本，當(dāng)光線通過(guò)時(shí)，波長(zhǎng)和振幅變化不大，在明場(chǎng)觀察時(shí)很難觀察到標(biāo)本。
相差顯微鏡利用被檢物體的光程之差進(jìn)行鏡檢，也就是有效的利用光的干涉現(xiàn)象，將人眼不可分辨的相位差變?yōu)榭煞直娴恼穹?，即使是無(wú)色透明的物質(zhì)也可成為清晰可見(jiàn)。這大大便利了活體細(xì)胞的觀察，因此相差鏡檢法廣泛應(yīng)用于倒置顯微鏡。
4.微分干涉鏡檢術(shù)
微分干涉鏡檢術(shù)出現(xiàn)于60年代，是利用特制的渥拉斯頓棱鏡來(lái)分解光束。分裂出來(lái)的光束的振動(dòng)方向相互垂直且強(qiáng)度相等，光束分別在距離很近的兩點(diǎn)上通過(guò)被檢物體，在相位上略有差別。由于兩光束的裂距極小，而不出現(xiàn)重影現(xiàn)象，使圖像呈現(xiàn)出立體的三維感覺(jué)。
5.霍夫曼調(diào)制相襯
原理是利用斜射光照射，它將相位梯度轉(zhuǎn)換為光強(qiáng)度變化，這樣可以用來(lái)觀察未經(jīng)染色的樣品和活細(xì)胞。這項(xiàng)技術(shù)可以視厚樣品觀察有立體感。
6.塑料DIC
塑料DIC不同于普通的透射微分干涉顯微術(shù)(DIC)，它不用偏振光這樣的特殊光線照亮目標(biāo)物，因此聚光鏡側(cè)也沒(méi)有起偏器。在透過(guò)DIC棱鏡后光線才形成線性偏振光，接下來(lái)的檢偏鏡使在同一平面震動(dòng)的光透過(guò)，因此形成干涉。