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推薦一個(gè)SVEAOPAL色譜柱的通用沖洗流程

閱讀:785        發(fā)布時(shí)間:2020-1-27
   使用后對(duì)SVEAOPAL色譜柱的沖洗保存也比較重要,使用了緩沖系統(tǒng)的尤其要注意。
 
  這里推薦一個(gè)SVEAOPAL色譜柱的通用沖洗流程:
  將所有通道置換成含有較低有機(jī)相比例的水相中,比如10-30%乙腈或甲醇,然后沖洗1個(gè)小時(shí),然后再梯度增加有機(jī)相比例,各沖洗一定時(shí)間,保留在高有機(jī)相比例的沖洗液里。低有機(jī)相比例的沖洗液是為了盡可能地沖洗緩沖鹽。
 
  通常低壓梯度洗脫的液相色譜儀采用的是四元泵,就是單泵四通道,比例閥混合。這種混合方式有個(gè)弊端,就是混合效果差,因?yàn)楦魍ǖ啦煌壤峭ㄟ^(guò)開(kāi)關(guān)各通道閥的時(shí)間來(lái)控制的。
 
  打比方乙腈:緩沖鹽=50:50,如果流速是1.0mL/min,并不是說(shuō)乙腈和緩沖鹽以各0.5mL/min的流速來(lái)混合;而是流速一直是1.0mL/min,但是在往復(fù)泵一個(gè)來(lái)回的時(shí)間內(nèi),兩個(gè)通道分別打開(kāi)一半的時(shí)間,也就是說(shuō)系統(tǒng)管道里是一段乙腈、一段緩沖鹽。這樣就會(huì)造成鹽的析出。
 
  所以,往往是兩通道混合,就算沒(méi)有用緩沖鹽,還是建議先按比例混合好了,然后走單通道,否則的話一樣會(huì)造成鹽析出,或者基線波動(dòng)。
 
  走梯度洗脫的話,往往會(huì)把有機(jī)相通道(B)中加入一定比例的水,或者把水相通道(A)配成梯度洗脫的初始比例,把有機(jī)相通道(B)配成梯度洗脫的比例。

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