SVEA進(jìn)口色譜柱的工作原理及如何長期保存
閱讀:3197 發(fā)布時間:2021-4-18
SVEA進(jìn)口色譜柱的工作原理:
當(dāng)流動相中攜帶的混合物流經(jīng)固定相時,其與固定相發(fā)生相互作用。由于混合物中各組分在性質(zhì)和結(jié)構(gòu)上的差異,與固定相之間產(chǎn)生的作用力的大小、強(qiáng)弱不同,隨著流動相的移動,混合物在兩相間經(jīng)過反復(fù)多次的分配平衡,使得各組分被固定保留的時間不同,從而按一定次序由固定相中流出。
SVEA進(jìn)口色譜柱的保存:
(1)反相色譜柱每天實(shí)驗(yàn)后的保養(yǎng):
使用緩沖液或含鹽的流動相,實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)用10%的甲醇/水沖洗30分鐘,洗掉色譜柱中的鹽,再用甲醇沖洗30分鐘。注意:不能用純水沖洗柱子,應(yīng)該在水中加入10%的甲醇,防止將填料沖塌陷。
(2)長期保存色譜柱:
如色譜柱要長時間保存,必須存于合適的溶劑下。對于反相柱可以儲存于純甲醇或乙腈中,正相柱可以儲存于嚴(yán)格脫水后的純正己烷中,離子交換柱可以儲存于水中,并將色譜柱附送的堵頭堵上。儲存的溫度較好是室溫。
注意事項:
1.如果在本產(chǎn)品中額外再加入終濃度為1×的、新鮮配制的蛋白酶抑制劑復(fù)合物,可以更有效地抑制蛋白酶活性,防止蛋白降解。
2.如果用于信號傳遞研究,zuì好在本產(chǎn)品中加入終濃度為1×的、新鮮配制的磷酸酶抑制劑復(fù)合物。
3.整個裂解步驟都要在冰浴或4℃操作。本產(chǎn)品和PBS均需預(yù)先冷卻。
4.本產(chǎn)品所含有較高濃度的去垢劑會對Bradford蛋白濃度測定有較大影響,因此只能使用BCA法測定蛋白濃度。